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前言 人类中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤是脑胶质瘤和脑转移瘤。由于它们呈侵袭性生长，使得临床治疗困难，是导致病人死亡的主要原因。 目前的研究表明，恶性肿瘤的侵袭及转移呈三步曲机制：1．瘤细胞粘附细胞外基质（ECM）；2．局部基质被瘤细胞分泌的蛋白酶所降解；3．瘤细胞伸出伪足向被降解的基质区域运动。肿瘤细胞通过上述三步骤完成其突破宿主细胞外基质屏障，造成侵袭及转移的结果。 细胞粘附因子CD44的变异型(CD44V6)与人类恶性肿瘤的发生和转移有关。而基质金属蛋白酶（MMPs）在肿瘤的侵袭、转移中的作用也越来越受到人们的重视。 目前国内外有关脑肿瘤组织中CD44V6、MMP-9表达的研究报道尚不多见。为了进一步研究CD44V6及MMP-9在脑肿瘤组织中的表达，探讨其临床应用意义，我们进行了免疫组化检测。 实验材料与方法 1．临床资料 选用中国医科大学附属一院神经外科2000年3月至2003年12月手术病理证实的脑转移瘤25例，同期手术病理证实的胶质瘤（WHOⅢ～Ⅳ级）30例，良性脑肿瘤25例。10例在脑外伤手术内减压中切除的脑组织作为正常对照。 2．免疫组织化学试剂 一抗单克隆抗体为鼠抗人CD44V6、MMP-9均购于北京中山生物技术有限公司。免疫组织化学染色采用S-P法，S-P试剂盒为北京中山生物技术有限公司产品。分别用已知的阳性切片作阳性对照，用PBS代替一抗作阴性对照。 3．染色方法为常规SP法。 4.结果判定标准。 在200倍显微镜下观察细胞膜细胞浆，如出现黄色、棕黄色染色为阳性细胞，计数5个高倍视野，阳性细胞数小于5%者为“一”;阳性细胞数5-50%者为“+”:阳性细胞数大于50肠者为“‘”。 5.统计学处理 采用SPSS .10软件进行xZ检验及相关性分析。结果 MMP一在正常脑组织中未见明显染色;在良性脑肿瘤组织中阳性率为24%呈低表达;在胶质瘤组织中阳性率为86.67%呈高表达，主要在侵袭边缘瘤细胞和血管基底膜上及内皮细胞胞浆见阳性染色;在脑转移瘤中阳性率为88%呈高表达。脑转移瘤与胶质瘤MMP一的表达率无差异P>0.05。而两者与正常脑组织和良性脑肿瘤组织的表达率有明显差异P<0.05。 CD44V6仅在脑转移瘤组织中呈阳性表达，阳性率为52%。在正常脑组织、良性脑肿瘤及胶质瘤组织中不表达，统计学上有明显差异。讨论 肿瘤的侵袭、转移是瘤细胞与宿主间复杂、多步骤相互作用的结果。而粘附是前提条件。粘附分子CD44广泛存在于细胞表面，是一类跨膜糖蛋白，它能与细胞外基质（ECM）中的透明质酸（HA）结合，参与细胞重建、迁移，扩增细胞间隙、炎症反应和肿瘤的发生、发展等许多生理、病理过程。其变异体CD44V6与甲状腺癌、乳腺癌、结肠癌等恶性肿瘤的发生及转移密切相关。 uH等研究发现，CD44V6仅在脑转移瘤中表达，而在胶质瘤及正常脑组织中不表达。这提示CD44V6与恶性肿瘤的转移过程密切相关。本组实验得到了与之相类似的结果。提示我们CD44V6作为淋巴细胞的归巢受体，可通过与远端血管及淋巴管内的配体集合，使形成转移的癌细胞获得更稳定的结合，集落式生长，从而逃避人体免疫系统的识别和杀伤，产生免疫逃逸，形成转移瘤。CD44V6作为透明质酸的主要受体，能连接细胞基质中的纤维连接蛋白、层粘连蛋白、I型胶原和透明质酸分子，以及与骨架蛋白相结合，参与细胞伪足形成，引起细胞形态和游走性的改变，为肿瘤细胞的浸润转移奠定了基础。CD44v6在脑转移瘤组织中的异常表达与其浸润转移关系密切，而脑胶质瘤极少发生脑外转移，这是众所周知的，其生物学原因尚不清楚。而本组实验结果，C巩V6在胶质瘤中不表达，也许可以从生物学角度解释罕有颅外转移的原因。 因此我们认为CD44 v6在肿瘤的转移过程中起作用，可以作为转移表型。C凡v6表达的检测有可能在病理学诊断中起辅助作用，以帮助我们区分颅内原发肿瘤还是转移瘤。 恶性肿瘤侵袭过程中，瘤细胞与细胞外基质（ECM）中无形基质粘附后使相关组织分泌基质降解酶，致局部正常脑组织被降解，形成局部侵袭生长，在这个过程中常伴有血管的重塑和正常脑组织的破坏。而基质金属蛋白酶（MMPs）正是其中一类重要的酶类。 Nakan。等研究发现MMP一的基因转录表达水平与肿瘤的恶性程度密切相关。本组实验以免疫组化方法测量了良性肿瘤、胶质瘤（111，W）与脑转移瘤三者MMP刁的表达强度，并以正常脑组织作对照。得出类似结果，即随着肿瘤恶性程度的提高，MMP一的表达增强，在胶质瘤（111一W）与脑转移瘤两者之间，MMP一的表达强度无明显差别。而与良性肿瘤有明显差别P<0.01，该结果提示MMP一在肿瘤的侵袭中发挥作用，主要体现基质降解表型，作为脑肿瘤的恶性表型可帮助病理诊断，指导临床治疗。 另外有学者发现组织的蛋白降解和勃附分子整合素（inte护n）结合的相互协调是恶性肿瘤细胞穿越基质的最有效手段。Yu等认为CD料V作为MMP一在细胞表面的附着点，以确保CD44介导的肿瘤浸润机制。CDov6对M