余甘子叶总黄酮的部分临床前研究

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目的:研究余甘子叶总黄酮的提取分离方法,并建立余甘子叶提取物中总黄酮含量的测定方法,探讨余甘子叶总黄酮对大鼠慢性支气管炎并肺气肿的影响及其对大鼠的长期毒性作用,为将余甘子叶开发为治疗慢性阻塞性肺疾病(COPD)的药物提供实验依据。  方法:1.采用渗漉及柱层析洗脱萃取法提取分离余甘子叶总黄酮。2.以槲皮素为对照品,利用紫外可见分光光度法通过测定吸光度计算余甘子叶提取物中总黄酮的含量。3.采用气管内注入脂多糖(LPS)及烟熏的混合刺激方法建立大鼠慢性支气管炎并肺气肿模型,余甘子叶总黄酮按照高、中、低剂量进行灌胃,采用病理组织切片及血气分析方法,观察余甘子叶总黄酮对慢性支气管炎及肺气肿的病理及血氧含量的影响。4.余甘子叶总黄酮按照高、中、低剂量对大鼠进行连续12周灌胃,观察给药期间大鼠的一般状况和体质量的增长、血常规、凝血时间、血液生化指标及组织器官等方面的变化。  结果:1.余甘子叶经渗漉提取及柱层析洗脱萃取分离得到余甘子叶总黄酮粉末,其得率为4.77%。2.槲皮素在2.375-38μg/mL范围内呈良好的线性关系,回归方程为:A=0.0303C-0.0182,r=0.9999,测得余甘子叶提取物中总黄酮平均含量为51.60%。3.对由LPS加烟熏引起的慢性支气管炎并肺气肿大鼠的支气管炎症及肺泡病理损害有明显保护作用,能减少支气管壁炎症细胞浸润及肺大泡形成,并能提高动脉血氧含量,各项指标均优于模型对照组及阳性药物组,而接近于正常对照组。4.与空白对照组相比,余甘子叶总黄酮各剂量组对大鼠的一般状况、体质量的增长、血常规、凝血时间、血液生化指标、主要脏器系数、重要脏器组织结构等无明显影响(P>0.05),停药2周后检测上述各指标也均未见明显异常变化(P>0.05)。  结论:余甘子叶总黄酮具有较好的防治慢性支气管炎并肺气肿作用,其在0.352g/kg-1.407g/kg范围内无明显毒副反应,临床长期服用较为安全。
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