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目的:研究睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)对视神经损伤后视网膜神经节细胞(retinal ganglion cell,RGCs)凋亡的影响。
方法:从34只青紫兰兔中随机选取32只,采用中号显微血管夹建立视神经中度损伤模型后,取左眼(32只眼)作为治疗组在即时、1天、3天、7天时分别向玻璃体腔内注入2μl(1μg/μl)睫状神经营养因子溶液;取右眼(32只眼)作为实验对照组,同治疗组在每个时间点向玻璃体腔内注入2μl双蒸水。于损伤后1天、3天、7天、14天各时间点随机抽取8只兔做HE染色、原位末端标记法(TUNEL)和电镜观察。剩余2只兔设为正常对照组,不作任何处理,直至观察期结束采用HE染色、TUNEL检测、电镜观察。
结果:视神经损伤早期视网膜神经节细胞层(ganglion cell layer,GCL)就有RGCs凋亡发生。凋亡RGCs数随视神经损伤时间延长而变化(P<0.05)。伤后1天,治疗组和实验对照组凋亡RGCs数两组间相比较无统计学意义(P>0.05)。伤后3天、7天、14天时治疗组的凋亡RGCs数明显比实验对照组少(P<0.05)。电镜下可见除正常对照组基本无凋亡细胞外,其余两组均观察到凋亡细胞,表现为细胞质浓缩,细胞核染色聚集、断裂形成粗细不均的颗粒散布于细胞浆中,有细胞浆空泡及核固缩现象,线粒体肿胀、嵴断裂缺失。治疗组中的典型凋亡细胞明显少于实验对照组。
结论:玻璃体腔内注射外源性睫状神经营养因子可以减少视网膜神经节细胞的凋亡,对兔视神经中度损伤后视网膜神经节细胞具有明显保护作用。