背景:白血病是由一系列与细胞生长、分化与死亡相关的众多基因变异所导致的异质性疾病,是造血系统的恶性肿瘤。化疗和移植是目前白血病治疗的主要手段,但大多数患者只能获得短暂缓解,最终因复发或耐药而死亡。高三尖杉酯碱(HHT)是化疗的常用药物,但剂量大时病人容易出现副反应。细胞分化异常是白血病发生的重要原因之一,深入认识细胞分化及异常的发生机制可以为白血病的治疗提供新的手段。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi)是以组蛋白乙酰化修饰为作用靶点的新的抗血液肿瘤药物,很多研究显示,HDACi能够通过诱导细胞凋亡和分化、促使细胞周期阻滞而抑制血液肿瘤细胞增殖。目前,多种HDACi已经进入临床试验阶段,并且显示出较好的抗血液肿瘤疗效。　　 设计及目的:　　 本课题组选用的SAHA(suberoylanilide hydroxamic acid)是继HMBA(hexamethylenebisacetamide)之后的第二代羟肟酸类的组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histon dcacctylase inhibitor,HDACi)。目前,SAHA已经在美国进入Ⅱ期临床试验。研究表明,SAHA可以选择性诱导细胞周期负调控子p21的表达,从而阻滞细胞周期,同时可以诱导多种肿瘤细胞的分化和凋亡,但其诱导细胞凋亡的分子机制还不十分清楚。高三尖杉碱酯(HHT)是从粗榧科植物三尖杉或其同属植物中提出的有抗癌作用的生物酯碱,能抑制真核细胞蛋白质的合成,使多聚核糖体解聚,干扰蛋白核体糖功能,对细胞内DNA的合成亦有抑制作用。本研究将在SAHA特异性抑制肿瘤细胞生长的基础上,联合HHT治疗白血病,减少化疗药物HHT的注射量,其协同效应有可能使血癌治疗取得更加满意的疗效。　　 方法:　　 (1)通过细胞存活率实验,确定SAHA和HHT对急性髓系白血病(AML)细胞THP-1和Kasumi-1具有联合杀伤作用;(2)通过形态学分析,凋亡细胞染色实验,电镜观察SAHA和HHT联合诱导的凋亡。(3)通过western blot寻找SAHA和HHT共同作用的凋亡信号通路。(4)动物实验检测SAHA和HHT的体内杀伤作用。　　 结果:　　 体外实验表明SAHA和HHT联合使用对AML细胞系THP-1和Kasumi-1具有更强的杀伤作用,它们是通过TRAIL介导的细胞外凋亡途径来激活caspase家族的。体内实验表明,SARA和HHT联用能显著抑制SCID小鼠瘤体的生长,没有副作用,在一定程度上为临床应用提供了可行性。　　 结论及意义:　　 本研究利用组蛋白去乙酰化酶抑制剂(SAHA)是白血病治疗模式的新突破,其协同效应使肿瘤治疗的疗效获得了一定程度的提高,降低了化疗药物HHT的用量,进而减弱了副作用,为临床治疗提供实验基础。