【摘 要】
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紫菜因其具有高营养和高附加值而受到人们的广泛喜爱。在我国一些沿海省份,人工栽培紫菜已成为一项重要的产业,紫菜的育种也因此倍受重视。本实验运用化学诱变剂MNNG(N-甲基-
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紫菜因其具有高营养和高附加值而受到人们的广泛喜爱。在我国一些沿海省份,人工栽培紫菜已成为一项重要的产业,紫菜的育种也因此倍受重视。本实验运用化学诱变剂MNNG(N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍)处理坛紫菜叶状体细胞,观察不同浓度的诱变剂对体细胞生长发育的影响。结果显示:MNNG (7.5 ~120.0μg/mL)对坛紫菜叶状体细胞的生长有明显的抑制作用,而且随浓度的变化,对坛紫菜叶状体细胞后期的发育分化方向有不同的影响。7.5μg/mL、15.0μg/mL诱变处理组多向畸形细胞团和丝状体发育;30.0μg/mL和60.0μg/mL诱变处理组向团型叶状体发育;高浓度诱变处理组后期正常型叶状体比例较高。同时在细胞培养过程中发现一种与条斑紫菜单孢子结构、功能相似的类单孢子细胞。本实验通过优化坛紫菜蛋白质提取方法和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳,建立了坛紫菜蛋白质组技术方案。利用建立的方案,对叶状体藻体厚度性状明显差异的坛紫菜突变品系NO.2与NO.9的叶状体细胞蛋白质组进行了差异比较分析。发现NO.9组较NO.2组新增4个蛋白亚基斑点,2个蛋白亚基斑点表达量较NO.2组提高,2个蛋白亚基斑点表达量较NO.2组降低。对这8个差异蛋白亚基斑点进行肽片段指纹图谱分析,经数据库检索,鉴定出一个蛋白斑点为1,5-二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶(RubisCO)小亚基,数据库结构来源于坛紫菜。RubisCO存在于高等植物和自养细菌中,是所有光合生物进行光合碳同化的关键性酶。它参与了光合作用和光呼吸过程,调节两者之间的关系,对净光合速率起着决定性作用。我们推测RubisCO的表达差异可能与突变品系的叶状体厚薄差异相关。
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