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研究目的：CD147是免疫球蛋白超家族成员中的一种跨膜糖蛋白,本实验室前期研究表明CD147能促进恶性黑素瘤增殖、侵袭、转移和血管新生,但具体机制尚不完全清楚。葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter member1GLUT1)是一种分布在细胞膜的跨膜糖蛋白,介导葡萄糖在细胞膜上的转运,在细胞摄取利用葡萄糖过程中发挥重要作用。本研究拟通过对CD147与GLUT1在恶性黑素瘤细胞株A375中及人恶性黑色素瘤组织中相互作用的研究,明确其作用位点,在细胞中对于葡萄糖摄取的影响,为进一步明确恶性黑素瘤发生发展的分子机制提供理论依据。研究方法：1.用组织芯片免疫组化技术明确CD147、GLUT1在恶性黑素瘤组织中的表达及二者相关性。2.运用细胞免疫荧光技术观察A375细胞中CD147与GLUT1的定位。3.构建GLUT1与CD147全长及缺失突变体的真核表达载体。4.运用免疫共沉淀技术验证CD147与GLUT1相互结合,共转染GLUT1质粒及CD147的不同缺失突变体质粒至工具细胞293FT,分析CD147与GLUT1相互结合的位点。5.分别用A375及A375稳定干扰CD147细胞行裸鼠皮下成瘤。运用micro PET/CT成像技术检测两组裸鼠葡萄糖摄取的变化。然后用免疫组化方法分别检测移植瘤中CD147与GLUT1的表达。研究结果：1.免疫组化检测出GLUT1与CD147在人恶性黑素瘤中均有表达且二者正相关,具有统计学意义(P<0.05)。2.细胞免疫荧光发现A375细胞中CD147与GLUT1在细胞膜存在共定位现象。3.成功构建了GLUT1与CD147全长及缺失突变体的真核表达载体。4.Co-IP验证GLUT1与CD147相互作用的结果,并进一步证实CD147与GLUT1相互结合的区段位于CD147胞外第二个Ig样结构域。5.CD147干扰的A375细胞与正常A375细胞在裸鼠皮下成瘤。micro PET/CT扫描显示干扰CD147后裸鼠裸鼠移植瘤摄取葡萄糖明显下(P<0.05)。且免疫组化结果证实,干扰CD147组的移植瘤中,CD147与GLUT1的表达明显下降。结论CD147分子不仅能与GLUT1相互作用,CD147与GLUT1相互结合的区段位于CD147胞外第二个IgG样结构域,且CD147能正调节恶性黑素瘤细胞葡萄糖转运过程,为CD147参与恶性黑素瘤的糖酵解过程提供了进一步的理论依据。