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本论文以本实验室分离培养的野生黄伞(Pholiota adiposa(Fr.)Quél.)为实验材料,着重研究了黄伞液体培养工艺和菌丝体多糖提取工艺。采用体外抗自由基实验、血清溶血素测定实验(体液免疫功能)以及巨噬细胞吞噬率和吞噬指数实验(单核-巨噬细胞功能),探讨了黄伞子实体提取多糖A1,菌丝体提取多糖A2和纯化子实体精多糖PA的生物活性。 主要研究结果: 1.通过五种固体培养基(GYM培养基、综合PDA+苹果汁培养基、扬氏培养基、综合PDA培养基以及MMN培养基)对黄伞菌丝生长影响的对比实验,找出实验条件下相对较理想的培养基为综合PDA培养基。 2.运用单因素和正交实验方法,得出黄伞最佳液体培养基配方:葡萄糖2%、酵母浸粉0.8%、VB1300μg、Mg2SO4 0.04%、KH2PO4 0.1%、K2HPO4 0.1%。 3.得出黄伞实验范围内最佳液体培养条件:接种3块菌种,在25℃,pH5.5,摇床转速120r/m~140r/m条件下,培养12d。 4.通过栽培研究,形成了一套黄伞高产栽培技术。 5.通过单因素试验和正交试验确定了黄伞菌丝体多糖提取最佳工艺,即菌丝体粉碎粒径为160目、料水比1:25、提取时间2.5小时、提取温度80℃、提取1次,醇析多糖时使用无水乙醇、乙醇加入量1:3.5、醇析12小时。 6.采用Sevag法和离子交换柱法进行了多糖纯化研究,结果表明Sevag法处理两次有较理想的蛋白处理效果,蛋白去除率70%,但多糖回收率偏低仅有66.5%,而离子交换柱法蛋白去除效果不佳,仅31%。 7.纸层析实验初步鉴定黄伞菌丝体多糖的组成为单一葡萄糖。但纸层析效果不佳,需做进一步实验来确定黄伞菌丝体多糖的组成。 8.体外抗自由基实验显示,子实体提取多糖A1,菌丝体提取多糖A2和纯化子实体精多糖PA具有较好的抗氧自由基和羟自由基作用。 9.体液免疫功能实验中子实体提取多糖A1与菌丝体提取多糖A2实验阳性;单核-巨噬细胞功能实验中菌丝体提取多糖A2和纯化子实体精多糖PA实验阳性。又根据《保健食品检验与评价技术规范》中判定原则:体液免疫功能和单核-巨噬细胞功能实验结果均为阳性,就可判定该受试样品具有增强免疫力功能作用。可见菌丝体提取多糖A2具有增强免疫力功能。