慢病毒介导的XAF1基因过表达对放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R放射敏感性的影响

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ziyoushenghuozhe
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:探讨肿瘤抑制基因XAF1对放射抗拒人鼻咽癌细胞系CNE-2R的生长、增殖、凋亡情况及对其放射敏感性的影响,为治疗鼻咽癌提供新的思路。  方法:本研究利用慢病毒转染CNE-2R细胞,继而运用qRT-PCR实验和Western Blot实验,检测XAF1转染前后在CNE-2R细胞的mRNA和蛋白的表达,判定转染是否成功。并分别运用CCK-8实验、流式细胞术(FCM)检测XAF1转染前后细胞的增殖、凋亡及周期变化。另外,本研究还将对转染前后的细胞进行X线照射处理,运用克隆形成实验观察过表达XAF1后,CNE-2R细胞放射敏感性的变化。  结果:(1)用慢病毒转染CNE-2R细胞,成功构建了表达XAF1的XAF1-CNE-2R细胞株。本实验以XAF1-CNE-2R组作为实验组,以NC-CNE-2R组作为阴性对照组,以CNE-2R组为空白对照组。(2)实时定量荧光PCR和蛋白质印迹法分别发现XAF1mRNA和蛋白在实验组细胞处于高水平表达。而在阴性对照组和空白对照组中,XAF1则处以较低的表达水平。(3)三组细胞分别接受不同剂量射线照射后,通过CCK-8试验,XAF1-CNE-2R实验组细胞增殖活性与NC-CNE-2R阴性对照组及CNE-2R空白对照组细胞相比降低,而两对照组间无明显差异。(4)通过克隆形成试验,实验组细胞的放射敏感性较阴性及空白对照组高,而两对照组间未见明显差异。(5)通过流式细胞术检测细胞周期,发现XAF1过表达后,CNE-2R细胞G2/M期所占比例增加。与两对照组相比,差异有统计学意义。(6)运用流式细胞术对细胞的凋亡进行检测发现,XAF1过表达后,无论照射前后,实验组细胞凋亡率均较对照组偏高;且照射后凋亡率大于照射前,差异有统计学意义。  结论:(1)慢病毒可以稳定地转染人鼻咽癌放射抗拒细胞CNE-2R;用慢病毒载体构建的转染细胞株稳定的过表达XAF1。(2)XAF1在人鼻咽癌放射抗拒细胞CNE-2R高水平表达后,增强了CNE-2R细胞的放射敏感性;XAF1有可能是鼻咽癌治疗潜在的放疗增敏剂。
其他文献
计划生育是我国的基本国策,自从贯彻落实以来,有效促进了人口素质的提升和社会经济发展。但是,随着时代的不断发展,计划生育工作也呈现出新的趋势,需要对计生宣传工作进行创新,以适
近年来,随着经济的发展,人们生活水平和生活质量逐步提升,业余文化生活领域也大大扩展,摄影逐渐进入到生活领域。摄影是一门艺术,其在群众文化中较为普及。本文就以此为中心,结合工
2011年初,文化部、财政部联合下发《关于推进全国美术馆、公共图书馆、文化馆(站)免费开放工作的意见》,对全国公共图书馆全面推进免费开放提出了要求,进行了部署。国家从政策、行
第一部分内源性ghrelin、obestatin在急性胰腺炎患者临床过程中表达和意义的研究目的:观察内源性ghrelin、obestatin在急性胰腺炎(AP)患者早期临床过程中水平,分析其与AP不同
上海旅游景点处地铁的区域型拥挤给上海轨道交通带来不便,也影响了游客的潜在旅游心理。本文从城市交通入手,立足上海各旅游景点,旨在建立模型以设置上海旅游公共交通专线,以缓解
现代报纸的一个重要特色,就是刊用大量的新闻照片,而且有的照片以大篇幅被用在报纸的显要位置,受到读者的欢迎,提升了报纸的竞争力。但是,从目前报纸的需求来讲,一个亟待解决
从2003年开始,民生药业连续参加了央视黄金段位的招标,在今年11月18日举行的央视2005年黄金段位广告招标中,民生药业成功中标第一单元的5秒标板,第五、第六单元的5秒标版,此
计划生育是我国一项重要的基本国策。因此,在实际工作,要加强领导,坚持以认为本的原则,不断创新计划生育教育理念,做好宣传工作。因此,本文就如何做好计划生育宣传展开论述。
请下载后查看,本文暂不支持在线获取查看简介。 Please download to view, this article does not support online access to view profile.
期刊
中国残疾人口数量庞大,作为一个特殊和困难的群体,他们的民生生计关乎人本社会的内涵式发展。然而,现行的社会救助运行机制与办法,并不能满足残疾人群体日益多元化的现实需求。本