两株共生菌次生代谢产物的研究

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本论文从植食性昆虫—中华稻蝗(Oxya chinensis)的肠道和银杏(Ginkgo biolaba)的健康叶片中分别分离出一株稀有放线菌和一株真菌,并对这两株共生菌的次生代谢产物进行了分离、纯化、鉴定与初步的生物活性评价。利用硅胶、TLC、ODS反相柱、葡聚糖凝胶、HPLC等多种分离技术共分离得到47个单体化合物,综合利用多种波谱技术(HRESIMS、EIMS、IR、1H-NMR、13C-NMR、HMQC、1H-1H COSY、HMBC、TOCSY、NOESY、ROESY、CD)和Moshers法鉴定了46个单体化合物的结构,其中新化合物共计24个(2个苯并蒽醌类化合物、8个糖脂类化合物、7个三联苯类新化合物、7个二萜类新化合物)。对部分化合物进行了体外细胞毒活性、神经氨酸酶抑制剂活性和免疫抑制活性的测试,并对菌种进行了初步鉴定。具体结果如下:  从中华稻蝗肠道放线菌Amycolatopsis sp.HCal的液体发酵产物中得到12个单体化合物(1-12),鉴定了11个化合物(1-11)的结构,其中2个为新的苯并蒽醌类化合物(2R,3R)-2-hydroxy-8-O-methyltetrangomycin(1)和(2R,3R)-2-hydroxy-5-O-methyltetrangomycin(2)。从该放线菌菌体的甲醇提取物中分离到9个糖脂类化合物(13-21),其中8个为新化合物actinotetraose A-H(13-16,18-21)。体外活性测试实验表明,新化合物(2R,3R)-2-hydroxy-5-O-methyltetrangomycin对人胃癌细胞SGC-7901具有微弱的活性(IC50=77.59μM),化合物10对SGC-7901和RAW264.7(小鼠巨噬细胞)的活性(IC50分别为4.41和3.66μM)与阳性对照药盐酸阿霉素的活性(IC50分别为2.33和1.50μM)相近,化合物3、4、9和10对HeLa(人宫颈癌细胞)细胞均具有很强的细胞毒活性(IC50分别为0.27、0.11、0.56和0.39μM)。actinotetraose E(18)具有一定程度的免疫抑制活性,其选择系数(离体细胞毒活性/免疫抑制活性)较大。  从银杏叶片内生真菌Aspergillus sp.YXf3的次生代谢产物中分离鉴定了26个化合物(22-47),其中14个为新结构化合物,包括7个三联苯类新化合物4"-deoxy-5-desmethyl-terphenyllin(22)、5-desmethylterphenyllin(23)、4"-deoxycandidusin A(24)、4,5-dimethoxycandidusin A(25)、terphenolide(26)、4-ethylcandidusin A(27)和5-ethylcandidusinA(28),5个norcleistanthane类二萜aspergiloid A(35)、aspergiloid B(36)和aspergiloid E-G(37-39),1个cleistanthane类二萜aspergiloid C(40)以及1个isopimarane类二萜aspergiloid D(41)。Aspergiloid A-B和E-G的结构骨架类型均未见予先前报道的微生物次生代谢产物,本文首次描述了具有此类骨架的新型植物内生真菌产物。体外神经氨酸酶抑制活性测试表明,新化合物4"-deoxycandidusin A和terphenolide具有中等程度的抑制活性(IC50分别为9.05和5.79μM)。  另外,本论文对近几年关于放线菌和植物内生真菌方面的天然产物研究作了简要综述。
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