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肝纤维化是继发于肝脏炎症或损伤后组织修复的代偿反应。肝星状细胞的活化造成肝脏细胞外基质(extracellular matrix, ECM)过度沉积是导致肝纤维化的中心环节。若得不到及时治疗，肝纤维化会向肝硬化甚至肝癌发展。而近年来，基因治疗以其靶向性高，给药剂量低等优势逐渐成为药物开发的新方向。开发抗肝纤维化基因药物也成为治疗肝纤维化的研究热点。基于腺相关病毒（Adeno-associated virus，AAV）开发的基因治疗载体——重组腺相关病毒（Recombinant adeno-associated virus，rAAV）载体，被认为是最有前景的基因治疗载体之一，并在临床实验中取得了一定的成绩。但其体内基因表达效率太低是限制rAAV载体临床应用的关键问题之一。而高剂量的rAAV基因药物会引发机体免疫反应。因此，rAAV基因药物研究的当务之急之一是提高其基因表达效率。基于此，本论文设想寻找一种能够进一步提高rAAV载体转染纤维化肝脏的有效手段来提高肝纤维化治疗的有效性。通过查阅相关文献发现，RNAi极有可能是一种有效手段。本论文选用在肝纤维化过程中发挥关键性作用的肝星状细胞（LX-2），在细胞水平，从1719个miRNA中筛选出能够在LX-2细胞中促进rAAV表达效率的miRNA，并通过生物信息学的方法分析其靶基因以及涉及的信号通路，预测其可能机制。最终确定能够调节多条信号通路的miR-3133为进一步研究对象，推测其可能通过其靶基因CBL参与的ErbB信号通路实现rAAV表达的提高。本文选取可能影响泛素化途径的CBL基因进行了验证。实时荧光定量PCR分析（qReal-time PCR）结果证实了miR-3133能够下调CBL，说明了这种预测方法的可行性，也表明本文对miR-3133通过其靶基因CBL参与的ErbB信号通路实现rAAV表达的提高的预测可能是正确的。同时，miR-3133还能够下调促进肝纤维化的TGF-β在体内的受体——TGFBR1的表达，这使得miR-3133可能能够从抑制LX-2的活化和提高rAAV表达两个方面同时优化治疗效果。本课题筛选得到一种提高rAAV载体在LX-2细胞中表达的miRNA，并对可能靶基因进行了初步验证，为开发rAAV-miRNA基因药物治疗肝纤维化提供理论研究基础。