猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2)是重要的人畜共患病的病原,除感染猪、马、猫等动物之外,还可感染人,引起脑膜炎,并可能导致永久性耳聋或复视等后遗症、心内膜炎、败血症及突发性死亡。SS2感染已成为影响全世界养猪业的重要问题之一。对SS2的致病机制的研究尚不明确,尤其是SS2在动物各组织内的抗原定位和动态分布更不十分清楚。本实验采用特异性免疫荧光染色的方法对SS2在猪组织内的抗原定位和动态分布进行了研究,为进一步研究感染机制和致病机理提供依据。(1)建立特异性免疫荧光染色方法检测猪组织内SS2病原。直接从组织中检测SS2抗原,具有特异、敏感、快捷的特点。(2)猪链球菌2型在小型猪体内的组织定位。采用30头SPF巴马小型猪,随机分为10组,每组3头,其中两头用作感染,一头作为对照。用致病性猪链球菌2型的四川分离株ZY05719感染SPF巴马小型猪,分别于攻毒后的12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、10d时处死,剖杀并采集样品(扁桃体、淋巴结、肝脏、脾脏、肺脏、肾、脑),制作冰冻切片,并用特异性免疫荧光抗体进行染色,观察十日内细菌在各组织内的定位情况。实验表明,SS2主要定殖于扁桃体的隐窝附近;在脾的边缘区和动脉周围淋巴鞘附近、淋巴结的生发中心和皮质内、肝血窦、肺间质和肾小体中均可见菌体状荧光颗粒;在脑组织中发生脑膜炎的区域,如皮层等可检出细菌。(3)猪链球菌2型在小型猪体内的动态分布。采用30头SPF巴马小型猪,随机分为10组,每组3头,其中两头作为感染组,一头作为空白。用致病性猪链球菌2型感染SPF巴马小型猪,分别于攻毒后的12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d、7d、8d、10d时处死,用采集的样品制成冰冻切片(扁桃体、淋巴结、肝脏、脾脏、肺脏、肾、脑),用特异性免疫荧光抗体染色法和细菌分离方法,观察细菌在各组织内的动态变化。结果表明,细菌在肝、肾、肺和脾等实质器官内呈现相似的动力学,感染后的前3天持续上升,第6天开始下降;在扁桃体内12小时就能检出SS2,并持续存在细菌;SS2在脑组织中呈现的不规律分布。