硫酸酯化多糖的制备及其HIV-1抑制活性研究

来源 :北京工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jyk1987525
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艾滋病是目前世界上最危险的传染性疾病之一,其治疗己取得一定的成果。但是由于艾滋病病毒HIV-1具有高度的复杂性和变异性,容易出现抗药性,给艾滋病的治疗带来相当的难度。多糖及其衍生物的抗病毒作用已得到充分的证实,并用于临床作为抗病毒药物使用。为从丰富的天然资源中进一步寻求低毒和高效的抗HIV-1药物,本文选取植物多糖(枸杞多糖、大豆多糖和苦瓜多糖)和菌类多糖(灰树花多糖、姬松茸多糖、云芝多糖、茶树菇多糖和平菇多糖)为研究对象,进行了硫酸酯化和HIV-1抑制活性的研究,其主要研究工作内容如下:   1.硫酸酯化多糖的制备。选取植物多糖(枸杞多糖、苦瓜多糖和大豆多糖)和菌类多糖(姬松茸多糖、灰树花多糖、云芝多糖、茶树菇多糖和平菇多糖)8种多糖为对象,采用Sevag法去除多糖游离蛋白,乙醇沉淀多糖溶液,H2O2脱色降解多糖,氯磺酸-吡啶法对多糖硫酸酯化;通过用不同摩尔比的吡啶和氯磺酸的硫酸酯化、不同截流分子量的透析袋的分离,以获得不同硫含量、不同分子量的硫酸酯化多糖:在多糖及硫酸酯化多糖的基本性质的测定中,以FoLin-酚试剂反应测蛋白质含量;以蒽酮-硫酸法测多糖的含量;以高效渗透凝胶色谱法测多糖及硫酸酯化多糖的相对分子质量;以硫酸钡浊度法测硫酸酯化多糖的硫含量。   2.硫酸酯化多糖的HIV-1抑制活性研究。采用了MAGI(MultinuclearActivation of Galactosidase Indicator)实验方法,对具有不同硫代度、不同分子量的硫酸酯化多糖的植物多糖(枸杞多糖、苦瓜多糖)和菌类多糖(姬松茸多糖、云芝多糖和茶树菇多糖)进行体外HIV-1抑制实验,确定上述多糖的抗HIV-1的活性,从而探讨硫酸酯化多糖的多糖种类、硫含量和分子量等对HIV-1抑制活性的影响;通过BIA技术对硫酸酯化多糖与gp41之间作用的检测研究,确定gp41可作为硫酸酯化多糖抑制HIV-1的作用位点。  
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