金环蛇蛇毒丝氨酸蛋白酶抑制剂和三种胡蜂蜂毒的研究

来源 :中国科学院昆明动物研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:luorui2008
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蛇毒和蜂毒是提供药理学活性分子的丰富来源,它们富含肽和蛋白,包括一些酶类和毒素。   丝氨酸蛋白酶抑制剂广泛存在于动物、植物和微生物体内,参与许多重要的生理过程,如血液凝集、纤维蛋白溶解、细胞凋亡、发育以及炎症反应和补体活化等(van Gent D.et al.,2003)。通过凝胶过滤、离子交换和反向高压液相色谱,从金环蛇毒液中纯化得到一种天然的丝氨酸蛋白酶抑制剂,命名为bungaruskunin。并且从该蛇的毒腺cDNA文库中克隆到了它的核苷酸序列。bungaruskunin预测的前体由83个氨基酸组成,包括含有24个氨基酸的信号肽和含有59个氨基酸的成熟肽。它与一种由红腹伊澳蛇(Pseudechis porphyriacus)的cDNA预测到的丝氨酸蛋白酶抑制剂blackelin具有最大相似性,达64%。Bungaruskunin是一种Kunitz型的蛋白酶抑制剂,具有一个保守的Kunitz结构域,能够抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和弹性蛋白酶。通过对金环蛇毒腺cDNA文库的筛选,还得到了另外两条β-bungarotoxin B链,Bungaruskunin的整体结构与β-bungarotoxin B链相似,特别是它们都具有高度保守的信号肽序列。这些发现强烈地表明蛇毒Kunitz/BPTI蛋白酶抑制剂与神经毒性的类似物可能起源于共同的祖先。   肥大细胞脱粒肽是从膜翅目昆虫的毒液中鉴别出的一个小肽家族,是一种具有潜在的药物治疗作用的诱导活性分子(Xueqing Xu et al.,2006)。来源于蜂类的缓激肽样的类似物vespakinin家族是一种具有调节和激素功能的活性成分,与哺乳动物和两栖动物的缓激肽类似(Naka jima T.,1984)。本研究对三种胡蜂的毒液进行了一系列的活性检测,发现黑尾胡蜂的蜂毒对白色念珠菌Candida albicans和金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus有抑制作用。凹纹胡蜂和黑尾胡蜂的蜂毒具有微弱的磷酯酶A2活性。通过凝胶过滤和反向高压液相色谱,没有得到相关的活性组分。通过对三种胡蜂毒腺cDNA文库的筛选,得到了2条来源于黑尾胡蜂的核苷酸序列,Blast分析表明,其中一条编码类似肥大细胞脱粒肽,但未克隆到全长,序列比对结果显示其与来源于大胡蜂(Vespa magniflca)的Mastoparan-like peptide 12c precursor(GenBank accession AOSPI0)的核苷酸序列相似性达98%(Xueqing Xu et al.,2006);另一条编码缓激肽类似物,命名为Hw-bradykinin,序列比对结果显示其与来源于大胡蜂(Vespa magnifica)的vespakinin-M precursor(GenBank accessionABG75944)的核苷酸相似率达96%(Zouhong Zhou et al.,2006)。
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