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目的:
体外培养人髓核细胞，使用不同浓度的基质金属蛋白酶组织抑制剂-1对髓核细胞进行干预，观察不同浓度的基质金属蛋白酶组织抑制剂-1干预下的体外髓核细胞生物学活性的影响，初步探讨TIMP-1对椎间盘退变缓解或逆转的作用。
方法:体外培养人髓核细胞10例，每例细胞传代后共分6组，以不同浓度的基质金属蛋白酶组织抑制剂．1分别对传代后的髓核细胞进行干预，其中A组为对照组(即TIMP-1浓度为0ng/ml)，另5组加入TIMP-1进行干预，浓度分别为（1，10，20，40，80ng/ml），即B组、C组、D组、E组、F组。分别于干预后第2,4,6，8d采用WESTERN BLOTTING技术测定各组Ⅱ型胶原的定量表达。并于第6d对髓核细胞行甲苯胺蓝染色检测髓核细胞中蛋白聚糖的表达，第8d对髓核细胞行细胞免疫荧光染色法测定各组髓核细胞Ⅱ型胶原的表达。
结果:
(1)甲苯胺蓝染色显示:细胞胞浆呈天蓝色，系细胞内蛋白聚糖被甲苯胺蓝深染，越靠近细胞核染色越深。随TIMP-1浓度的增加，染色结果亦逐渐加深。于40ng/ml组染色最深。
(2)细胞免疫荧光染色显示:染色后于倒置荧光显微镜下显示髓核细胞呈淡绿色或绿色荧光，荧光主要分布于细胞胞浆，而细胞核部分几乎无荧光显示。随着TIMP-1浓度上升，荧光强度逐渐增强(P＜0.05)，且TIMP-1浓度为40ng/ml（E组）时荧光强度达到最大值;F(80ng/ml)组与E组相比荧光强度明显减弱。
(3)WESTERNBLOTTING显示:随着TIMP-1作用时间的延长Ⅱ型胶原的表达量逐渐上升(p＜0.001)。且随着TIMP-1浓度上升，Ⅱ型胶原的含量也逐渐增加(P＜0.001)，TIMP-1浓度为40ng/ml（E组）时Ⅱ型胶原的含量达到最大值;F（80ng/ml）组与E组相比Ⅱ型胶原的含量明显减少。
结论:
(1)TIMP-1干预后，髓核细胞中Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达量明显上升，提示其可有效缓解或逆转椎间盘髓核细胞的退变。
(2)随着TIMP-1作用浓度的上升，髓核细胞中Ⅱ型胶原的蛋白表达量也逐渐上升。当TIMP-1的浓度在40ng/ml时，Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达量达到峰值;TIMP-1浓度在80ng/ml时，Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的表达量不升反降，提示TIMP-1的最佳作用浓度应该在40ng/ml左右;过量的TIMP-1可能存在细胞毒作用。