类伸展蛋白PEX1在颖果发育中的功能研究

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aqqz2000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻(Oryza sativa.L)是重要的粮食作物之一,也是单子叶植物研究的模式植物。水稻颖果的大小直接影响产量,对粒型研究有利于产量的进一步提高。课题组通过Ac/Ds双因子转座系统筛选得到了一个矮秆半显性突变体pex1,经TAIL-PCR(Thermal Asymmetric Interlaced PCR)及生物信息学分析表明,该突变基因(OsPEX1)属于类伸展蛋白(extensin-like protein)家族LRX(leucine-rich repeat extensins)。研究表明,OsPEX1是水稻木质素代谢调控的重要基因,过量表达OsPEX1可获得株高降低、茎秆机械强度增加、抗倒伏性状显著改良的水稻品种,而其对颖果发育的影响尚不清楚。为探究OsPEX1在颖果发育过程的作用,本研究通过观测pex1突变体颖果表型及动态发育过程以及OsPEX1基因的表达分析,同时构建OsPEX1基因的过量表达载体以及反义抑制载体,通过农杆菌介导的遗传转化获得转基因植株,探究OsPEX1基因在水稻颖果发育调控中的功能,并通过瞬时表达确定PEX1蛋白的亚细胞定位,主要研究结果如下:(1)观测成熟的颖果及谷壳,发现突变体的谷壳与野生型无差异,而颖果大小却极显著小于野生型。发育过程中,突变体谷壳大小与野生型无差异,而颖果的大小在授粉后第7天开始明显小于野生型。(2)对授粉后第1-10天的野生型颖果及谷壳进行OsPEX1基因的表达量分析,发现OsPEX1在颖果中的表达量相比谷壳较高,并在授粉后第7天达到峰值。通过对野生型和纯合突变体的授粉后第7天颖果及谷壳进行表达分析,结果表明OsPEX1基因在突变体谷壳的表达量与野生型无明显差异,而在颖果中的表达量是野生型的4.4倍,说明突变体pex1颖果的变小与OsPEX1基因的过量表达有关。(3)构建过表达载体和反义抑制载体,通过农杆菌介导转化中花11愈伤,获得转基因阳性植株,并观测颖果及谷壳长宽、百粒重、单株结实率及花粉粒活性。与野生型相比,过表达转基因植株的谷壳不变,颖果显著变小。反义抑制转基因植株的结实率明显降低,谷壳变小且颖果宽度极显著变窄。功能互补实验说明颖果的发育与OsPEX1基因的表达量密切相关,表达量过高或者过低均会影响颖果的发育表达量过低还导致水稻育性降低。(4)构建GFP瞬时表达载体,瞬时转化烟草表皮细胞,在荧光显微镜下观察发现OsPEX1蛋白定位在细胞壁上,且呈点状荧光聚集。为进一步确定点状荧光的位置,通过截短OsPEX1基因构建LRR结构域瞬时表达载体,转化到水稻原生质体,与内质网的标记蛋白进行荧光共定位,结果显示OsPEX1蛋白的LRR结构域定位于内质网。对OsPEX1基因的研究将有助于进一步了解LRX家族的功能,丰富水稻粒型遗传的调控机制,更有助于探索水稻谷壳和颖果发育的关系。
其他文献
通过实地调查与文献查阅,研究了大云雾山的植物资源组成和植物区系分布类型,探讨了本区珍稀濒危植物和植物资源分类及植被类型,研究结果如下:1.共记录到维管植物170科510属903种(栽培或逸生植物61种,野生维管植物842种)。包括蕨类植物,29科50属和86种,裸子植物,3科3属和5种,被子植物,138科457属和812种,其中,双子叶植物,101科311属和446种,单子叶植物,12科78属和1
采收作业是水果生产的重要环节,目前有人工采收和机械采收,其中我国的香蕉采收主要是人工采收,人工采收劳动投入大、采收效率低、采收成本高,阻碍了我国香蕉产业的发展。我国的香蕉种植模式以散户为主,而且蕉园环境比较复杂,导致我国香蕉采收机械化水平总体上不高。本文考虑香蕉的农艺学特性和采收特点,研制一种香蕉采收机,提高香蕉的采收效率,对香蕉产业的发展具有重要意义。本文通过了解国内外果园机械的发展状况,结合我
呕吐毒素(deoxynivalenol,DON)是全球污染程度最广的霉菌毒素之一,是引起畜禽肠道损伤的常见诱导因子。DON破坏肠道黏膜结构,削弱肠道黏膜屏障和消化吸收功能,导致畜禽生长受阻,给养殖行业带来巨大的经济损失。本研究选用DON诱导小鼠肠道损伤模型,通过灌胃酶解小麦蛋白质(Hydrolyzed Wheat Gluten,HWG),探究其是否可减轻DON对肠道的损伤,并进一步解析其机制,旨在
本研究选用枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌、植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌对断奶仔猪饲粮进行袋装固态发酵。采用全收粪法测定固态发酵前后饲粮消化能、代谢能、营养成分含量及表观消化率的变化,并研究饲喂固态发酵饲粮对断奶仔猪生长性能、腹泻率、血液生化指标、免疫指标和肠道屏障、消化吸收功能的影响。试验一:采用枯草芽孢杆菌:地衣芽孢杆菌:酵母菌:植物乳杆菌:罗伊氏乳杆菌按活菌数1:1:1:0.5:0.5的比例对
本论文研究了日粮添加不同剂量盐酸吡格列酮(Pioglitazone Hydrochloride,PGZ)对黄羽肉鸡生长性能和肉品质的影响,并且在此基础上,探讨了PGZ与蛋氨酸铬(Chromium Methionine,Cr Met)联合使用对黄羽肉鸡生长性能、屠宰性能、血清生化指标、肝脏脂代谢和腿肌肉品质的影响。试验一,选取90日龄雌性黄羽肉鸡(平均体重791.11±0.44 g)90只,随机分为
溶菌酶在抗菌、消炎和抗病毒等方面都具有一定的作用,是动物饲粮中替代抗生素的重要选择之一。本论文测定了溶菌酶的体外抑菌效果及其对断奶仔猪生长性能、血液生化指标和小肠粘膜形态的影响,探究了溶菌酶替代饲粮中抗生素的可行性,为溶菌酶在断奶仔猪饲粮中的应用提供参考与依据。本论文由体外抑菌试验和动物饲养试验两个部分组成。其中,体外抑菌试验筛选得到溶菌酶体外使用的适宜浓度范围,并与抗生素进行对比,确定了溶菌酶的
在热带和亚热带地区,柱花草属(Stylosanthes)是极具经济重要性的豆科牧草,被称为“热带苜蓿”。柱花草在饲草生产、水土保持、果园覆盖等多方面都起着重要的作用。1962年,我国首次从马来西亚引种柱花草到海南,后来又引种到广西、云南、福建等地栽培。由于全球盐碱地比例逐渐增加,盐胁迫已成为限制柱花草栽植推广的重要障碍。本实验比较了不同柱花草的耐盐性,测定了柱花草不同组织中Sg NAC1和Sg N
众所周知,胰岛素样生长因子(Insulin-like Growth Factors,IGFs)广泛参与硬骨鱼类性腺发育和生殖过程。igf3在硬骨鱼类的多个组织中均有表达,尤其性腺中表达量最高,但igf3的表达模式、转录调节机制以及它是否对鱼类的性别决定与分化产生作用尚不清楚。本研究中以斜带石斑鱼(Epinephelus coioides)为研究对象,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术检测I
畜牧生产中,肉用动物的骨骼肌纤维类型、数量和横截面积直接决定着动物的肉产量。而肌肉发育特别是肌纤维的数量却决定于胚胎期,胚胎期肌肉的发育对出生后的骨骼肌生长有着至关重要的作用。近年来的研究证实,动物妊娠期母体某些营养物摄入不足和过剩都可能对胎儿有不利影响。妊娠期母体的营养水平对子代的发育,尤其是肌肉的发育有着重要的作用。最近的研究表明,循环总胆汁酸(total bile acid,TBA)水平和骨
番茄是世界上最受欢迎的果蔬之一,番茄中含有许多对人体健康有益的营养元素,酸甜的口感也是消费者喜欢番茄的主要原因。番茄的品质是评估番茄价值的重要标准,能够对番茄价值进行直观的描述,是消费者选购番茄的重要参考。番茄的外部品质是影响消费者的购买意愿主要因素,并且番茄外部品质的变化也会导致番茄发生理化反应,从而影响到番茄的内部品质。本文以番茄为研究对象,利用计算机视觉技术对番茄的外部品质(颜色、大小、形状