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背景和目的:我们先前研究已经发现,Treg/Th17失衡及Treg细胞免疫抑制功能缺陷是结节病发病的重要原因之一。IL-35作为Treg细胞免疫抑制功能的执行者,通过促进Treg细胞增殖,抑制Th17分化并诱导iTr35细胞(分泌IL-35的Treg细胞亚群)生成发挥免疫抑制作用。我们推测结节病中Treg细胞的抑制功能缺陷和Treg/Th17失衡可能与IL-35分泌减少或其在细胞内信号传导途径异常有关。因此本研究将在先前研究基础上明确结节病中合成和释放IL-35的细胞来源及其表达情况;探讨IL-35在结节病的发病机制中可能发挥的生物学效应,此研究旨在探寻结节病的发病机制和寻找潜在的治疗靶点。方法:ELISA检测结节病组(n=98)和正常对照组(n=98)血浆中IL-35的水平,Real-time PCR检测结节病组和正常对照组IL-35两个亚基EBI3和p35的表达水平,以及Treg细胞转录因子Foxp3的表达水平。Pearson相关分析结节病患者血浆中IL-35的水平与临床参数的相关性。选取初治结节病患者10例,健康对照者10例,采用流式细胞术检测外周血中Treg细胞占CD4+T细胞的比例,IL-35在CD4+T细胞、CD8+T细胞、Treg细胞上的表达情况。结果:结节病组血浆中IL-35的水平(43.56±11.77pg/mL)明显低于正常对照组(55.18± 11.53 pg/mL),差异具有统计学意义(P<0.001)。结节病治疗组(n=57)较未治疗组(n=41)血浆中IL-35的水平明显升高(47.38±12.02pg/mL vs 40.82± 10.89 pg/mL;P=0.0059),结节病患者血浆中IL-35水平与DLCO占预测值%成正相关(r=0.76,P<0.001),而与其他临床参数未发现明显相关性。结节病组EBI3和Foxp3基因mRNA的表达水平均明显低于正常对照组(分别为 P=0.0016,P=0.0391),而p35基因mRNA的表达水平在两组间无明显差别(P =0.5816),结节病组和正常对照组EBI3基因相对表达量与Foxp3基因相对表达量均成明显正相关(分别为 r =0.786,P<0.001;r =0.730,P<0.001),p35 与 Foxp3 基因相对表达量在结节病组成低度正相关(r =0.383,P =0.037),而在正常对照组两基因表达无明显相关性(r=0.208,P =0.271)。流式细胞术检测发现,10例结节病患者外周血中Treg/CD4+T细胞的平均比例(5.82±0.51%)与健康对照者(5.71 ±0.90%)相比无显著差异(P=0.7413),在CD4+T细胞、CD8+T细胞和Treg细胞中均未发现表达IL-35的细胞。结论:结节病患者血浆中IL-35水平较正常健康者明显减低,且经激素和或免疫抑制剂治疗后水平升高,提示IL-35可能参与了结节病的炎症过程,在其发病过程中具有重要作用。结节病患者血浆中IL-35水平与DLCO占预测值%成正相关,提示其有可能作为预测结节病肺部病变进展的生物学指标。IL-35的一个亚基EBI3和Treg细胞转录因子Foxp3的mRNA表达水平均明显低于正常对照组,且EBI3、p35基因与Foxp3基因相对表达量成正相关,提示结节病患者外周血中Treg细胞数量的减少可能导致了 EBI3、p35基因生成减少,以至于EBI3与p35形成的异源二聚体减少,最终合成IL-35减少。而本研究采用流式细胞术检测人类T淋巴细胞亚群并未发现IL-35表达阳性的细胞,可能与人T淋巴细胞亚群中分泌IL-35的细胞数量太少有关,抑或IL-35可能主要由其它细胞亚群所分泌。