【摘 要】
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该研究的目的是构建用于文库筛选和酵母双杂交系统两种表达载体.采用PCR和RT-PCR方法,从带3蛋白(Band3)全长cDNA和K562细胞mRNA中分别扩增出约350bp、410bp的带3蛋白c末端和
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该研究的目的是构建用于文库筛选和酵母双杂交系统两种表达载体.采用PCR和RT-PCR方法,从带3蛋白(Band3)全长cDNA和K562细胞mRNA中分别扩增出约350bp、410bp的带3蛋白c末端和血型糖蛋白A(GPA)cDNA片段.测序后将其亚克隆至pGADT7载体和pGBKT7载体上.用醋酸锂法将构建好的pGADT7—Band3-c-end和pGBKT7-GPA转染酵母菌AH109,观察其在选择性培养基上的表达情况.结果表明,获得了350bpGPAcDNA和410bpBand3c-末端cDNA.pGADT7—Band3-c-end和pGBKT7-GPA对酵母无毒性,不能激活检测基因,可作为酵母双杂交系统中的靶基因,完成了两种表达载体的构建.
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