【摘 要】
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为了获得正常hBD-3成熟肽cDNA序列,本文以计算机模拟hBD-3成熟肽的结构,寻找合适的突变位点,采用PCR重叠延伸法对其进行定点突变,并在大肠杆菌中融合表达,初步测定突变体的抗
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为了获得正常hBD-3成熟肽cDNA序列,本文以计算机模拟hBD-3成熟肽的结构,寻找合适的突变位点,采用PCR重叠延伸法对其进行定点突变,并在大肠杆菌中融合表达,初步测定突变体的抗菌活性,为进一步研究hBD-3结构与功能的关系奠定基础。
通过大量的实验得出结论:成功构建了hBD-3成熟肽cDNA的突变体,并在大肠杆菌中诱导表达成功,经纯化后,获得了具有抗菌活性的mhBD-3多肽。为下一步突变蛋白抗菌活性的定量测定及与hBD-3蛋白抗菌活性的比较、真核表达奠定了基础。
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