米糠多糖的提取、免疫调节活性及其口含片制备工艺研究

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米糠是禾本科植物水稻轧制加工成精大米过程产生的,水稻广泛种植于东亚、南亚地区,是一种重要的粮食作物。目前对于米糠的研究主要涉及米糠油、植酸和肌醇等方面,而对于多糖方面的研究则相对较少。有鉴于此,本研究以米糠为原料,对其多糖提取工艺、免疫调节活性及口含片制备工艺进行了研究。主要研究结果如下:(1)以米糠为原料,利用碱提醇沉的方法提取米糠多糖,在单因素实验基础上,通过正交实验设计对提取工艺进行优化。分析结果表明,影响多糖SPK-1提取率的各因素按其主次顺序依次为:氢氧化钾溶液浓度(D)>提取温度(B)>提取时间(A)>液料比(C),所得最佳提取工艺条件为提取温度50℃,氢氧化钾溶液浓度2mol∕L,提取时间3h,液料比25:1。此时米糠多糖得率为2.69%,与理论预测值2.71%相差不大,说明正交优化米糠多糖的最佳提取方法可行。同时,测得米糠多糖SPK-1的多糖含量为87.04%;多糖SPK-2多糖含量为94.68%,戊糖含量为54.05%。(2)对米糠多糖SPK-1和SPK-2进行免疫调节活性实验研究,结果表明:用CCK-8法检测米糠多糖样品体外对小鼠脾脏淋巴细胞活性作用影响,发现在250μg/ml、50μg/ml,10μg/ml、2μg/ml浓度时,SPK-1能显著促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖,SPK-2在250μg/ml浓度时能显著促进小鼠脾脏淋巴细胞增殖且在试验浓度范围内没有表现出显著的毒性作用。当用ELISA法检测该样品对细胞因子分泌的影响,观察到米糠多糖SPK-1在25μg/ml、5μg/ml两个浓度下,可明显促进刀豆蛋白A诱导的小鼠脾脏淋巴细胞分泌IFN-γ。而SPK-2在5μg/ml、1μg/ml能够显著促进IL-2的分泌;在25μg/ml、5μg/ml时能显著促进IFN-γ的分泌;在5μg/ml、1μg/ml时能够抑制IL-10的分泌;在1μg/ml时可明显抑制IL-17分泌。(3)通过对米糠多糖口含片制备工艺进行综合研究分析,初步确定口含片制备工艺为:米糠多糖20g,乳糖20g,甘露醇10g,CMS-Na1g,润湿剂选择70%乙醇水溶液,硬脂酸镁0.45g,柠檬酸0.20g。按照该处方制粒干燥时控制颗粒水分为1.1%~4.1%,此时颗粒的流动性、成形性均较好,且乙醇残留及脆碎度均符合要求。通过对制得的口含片片重差异、崩解度及溶出度指标进行检查测定,为米糠多糖口含片进一步研究提供实验依据。
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