BRD4是布罗莫结构蛋白BET家族中的一员。跟其他的BET家族成员一样,BRD4也包含两个可识别乙酰赖氨酸残基的布罗莫结构域。BRD4是BET家族中研究得最彻底的一员,研究发现BRD4通过其布罗莫结构域在很多生物学进程中扮演重要角色。尤为重要的是,研究发现BRD4的激活表达跟黑色素瘤、肝癌、多发性骨髓瘤、Burkitt’s淋巴瘤、急性髓性白血病及乳腺癌的生存预后及转移密切相关。另外,BRD4的异位融合产物BRD4-NUT跟半数以上侵袭性肿瘤相关。我们前期的实验也发现BRD4与非小细胞性肺癌的侵袭转移能力关系密切,因此,BRD4可作为非小细胞性肺癌的一个潜在预后指标。本实验检测了BRD4蛋白在非小细胞性肺癌及对应癌旁组织中的表达水平,并且利用组织微阵列分析技术,验证了BRD4蛋白表达水平与非小细胞性肺癌临床病理参数的关系及其预后诊断价值。此外,通过小干扰技术抑制非小细胞肺癌细胞系中BRD4的蛋白表达后,我们发现其与非小细胞性肺癌的增殖、侵袭迁移和凋亡密切相关。因此,我们得出结论,BRD4具有潜在预后预测价值并可作为靶向治疗的新靶点,为非小细胞性肺癌的诊治带来新的曙光。第一部分BRD4在非小细胞性肺癌中高表达目的:探究BRD4蛋白在非小细胞性肺癌及对应癌旁组织中的表达情况,初步分析其在非小细胞性肺癌发生发展中扮演的角色。方法:qRT-PCR、Western Blot及免疫组化方法检测BRD4蛋白在非小细胞性肺癌患者癌与对应癌旁组织中的表达情况。结果:上述各方法的结果一致显示BRD4在非小细胞性肺癌患者癌组织中的表达量高于其在对应癌旁组织中的表达量,两者间有显著性差异(P<0.05)。结论:BRD4在非小细胞性肺癌患者癌组织中表达升高,可能在肿瘤发生发展过程中发挥重要作用。第二部分BRD4的预后诊断价值目的:探究BRD4与非小细胞性肺癌临床参数的关系及其预后诊断价值。方法:免疫组化方法检测208例非小细胞性肺癌患者癌与对应癌旁组织中BRD4蛋白的表达情况,用SPSS19.0软件统计分析BRD4与肺癌患者临床参数及预后的关系。结果:研究结果显示BRD4蛋白高表达与非小细胞性肺癌患者中的肺鳞癌、淋巴结转移、TNM分期及肿瘤分化程度等密切相关(P<0.05),且BRD4高表达组术后总体生存期明显比BRD4低表达组短(P<0.05);单因素及多因素分析结果显示BRD4蛋白表达是非小细胞性肺癌患者独立的预后预测因子。结论:BRD4与非小细胞性肺癌的病理类型、TNM分期、淋巴转移及肿瘤分化程度密切相关,具有预测预后的诊断价值。第三部分BRD4对非小细胞性肺癌细胞生物学行为的影响目的:研究BRD4蛋白表达水平的改变对非小细胞性肺癌细胞增殖、侵袭转移能力及凋亡的影响。方法:应用小干扰技术下调BRD4蛋白在非小细胞性肺癌细胞株A549与95-D中的表达,经Western Blot、流式细胞术验证干扰效率后,应用细胞划痕试验检测细胞迁移能力变化,Transwell小室侵袭实验检测细胞侵袭能力变化,CCK-8及BrdU免疫荧光检测细胞增殖能力变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果:vshRNA干扰后A549、95-D细胞株BRD4蛋白表达明显下调,且BRD4表达下调伴随着非小细胞性肺癌细胞增殖、侵袭迁移能力明显减弱,且凋亡率增加(P<0.05)。结论:BRD4具有促进非小细胞性肺癌细胞增殖、侵袭迁移的能力,且能抑制肿瘤细胞凋亡。