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肝脏疾病是人类发病率和死亡率很高的一类疾病,已成为全球性健康问题。近年来随着人们生活方式的改变,高脂肪饮食(High-fat deit,HFD)、高胆固醇饮食等所导致的非酒精性肝损伤(Non-alcoholic liver injury,NALD)和长期大量饮酒所导致酒精性肝损伤(Alcoholic liver disease,ALD),以及肝炎、肝硬化等肝脏疾病发病率呈递增趋势,严重威胁着人们的健康。研究表明,肝脏疾病和肠道微生物有着密切的联系,长期高脂肪、高胆固醇或大量酒精的摄入会引起肠道菌群结构发生改变,从而导致肝脏疾病的发生。大量研究表明,通过调节肠道微生物可以对肝脏疾病起到改善作用,例如,膳食脂肪酸的摄入能显著调节酒精诱导的肠道微生物的异常,从而减轻酒精诱导的肝脏损伤。黄秋葵[拉丁学名:Abelmoschus esculentus(Linn.)Moench],根据地域不同又叫咖啡黄葵、六角豆、羊豆角等,属锦葵科一年生草本植物。黄秋葵嫩果既作为营养丰富的鲜美蔬菜,又有药用和保健功效。此外,黄秋葵籽油(Okra seeds oil,OSO)是一种高品质植物油,富含多种不饱和脂肪酸。已有研究表明,黄秋葵提取物能有效抑制HFD引起的肥胖小鼠血脂和血糖的异常升高,能够明显改善肝脏细胞形态,同时还发现,这种效果可能是通过对肠道菌群的调节作用实现的。本研究以黄秋葵全果冻干粉或成熟优质的黄秋葵籽经冷压榨所得的黄秋葵籽油为材料,对其主要营养组成成分进行含量测定,并分别探究其对HFD诱导的NALD和酒精诱导的ALD的保护和改善作用,为黄秋葵保健食品和药品的开发提供参考依据。研究结果如下:(1)黄秋葵果荚中总黄酮、总酚和总多糖含量测定及OSO中脂肪酸组成和含量的分析:黄秋葵果荚经冷冻干燥并粉碎后,分别采用NaNO2-Al(N03)3法、Folin-Ciocalteu法和苯酚-硫酸比色法测定黄秋葵中总黄酮、总酚和总多糖的含量。结果表明,黄秋葵冻干果荚黄酮类化合物、总酚和总多糖分别为:43.1±4.7 mg/g、53.1±3.5 mg/g和499.1±20.4 mg/g。采用采用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析OSO中脂肪酸的种类及含量,结果显示OSO含有十三种脂肪酸,其中亚油酸含量最高,所占百分比达49.4%,其次是棕榈酸(26.8%)和油酸(11.4%)。总不饱和脂肪酸(USFA)为65.8%,总饱和脂肪酸(SFA)为34.2%。(2)补充黄秋葵粉(Okra pods powder,OPP)能改善HFD诱导的小鼠肝损伤和肠道菌群失调:采用OPP对高脂喂养小鼠进行连续12周的饮食干预实验来探究其对HFD诱导的肥胖小鼠的肝脏保护作用和对肠道菌群的影响。结果显示,黄秋葵粉能有效地改善高脂模型组肥胖小鼠的葡萄糖耐受性和胰岛素抵抗。通过饮食补充黄秋葵粉有效地抑制了 HFD小鼠的体重异常增加及体内脂肪积累,黄秋葵粉(低、中、高剂量)组小鼠体重分别降低了 9.7%、11.7%、18.6%;体重增长量分别降低了 1 0.4%、8.1%、25.9%;同时,脂肪系数分别降低了 27.4%、28.9%、48.2%。生化分析结果表明,黄秋葵粉通过降低血清总甘油三酯(TG),总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白(LDL)水平以及提升血清高密度脂蛋白(HDL)的水平来调节HFD诱导的脂质代谢紊乱。我们进一步发现,黄秋葵粉能有效的抑制高脂诱导的小鼠肝脏丙二醛(MDA)水平的升高,能够提高小鼠体内超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,同时还能降低HFD诱导的肝损伤标志物丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平。此外,我们发现模型组小鼠结肠中拟杆菌门(Bacteroidetes)的比率显著低于正常组,而黄秋葵粉的干预明显增加了高脂肪饮食小鼠结肠内容物中拟杆菌门的比例,同时能有效的抑制双歧杆菌属(Bifidobacterium)、脱硫弧菌属(Desulfovibrio)、毛螺菌属(Lachnospiracea)在HFD小鼠结肠中的异常减少。据此,黄秋葵粉可通过抑制高脂诱导的肥胖小鼠血糖调节异常、脂质代谢紊乱而缓解肥胖症状,同时增强肝保护作用,同时,我们发现黄秋葵粉能有效调节肠道菌群结构的异常改变。(3)补充OSO可改善乙醇诱导的肝损伤,同时调节小鼠肠道菌群失调:采用OSO为实验材料探究其对酒精诱导小鼠肝损伤的保护作用及肠道菌群的调节作用。通过对血清和肝脏生化指标的检测分析、血清脂肪酸分析以及肠道菌群组成结构的变化分析,从而研究OSO对乙醇诱导小鼠酒精性肝损伤的保护作用。结果表明,连续60天的干预喂养对单独的酒精灌胃组小鼠的体重异常减轻和肝脂肪积累有较强的抑制作用并且能有效拮抗AST、ALT和MDA的升高,而且,OSO提高了酒精灌胃组小鼠肝脏GSH-Px和T-SOD活性,改善了酒精诱导的肝损伤。通过肝组织病理切片的油红O和H&E染色观察结果也对这一结论进行了佐证。小鼠盲肠内容物细菌的16S rDNA基因序列分析显示,与单独乙醇灌胃组小鼠相比,OSO显著降低了小鼠的盲肠内容物中变形杆菌门(Prateobacteria)的比例,反之增加了拟杆菌门(Bacteroidetes)的比例。在属水平上,OSO干预组小鼠盲肠内容物中梭状芽胞杆菌属(Clostridium XlVa)和葡萄球菌属(Staphylococcus)的丰度显著减少,因此,OSO能够有效干预酒精诱导的主要肠道微生物失调。以上结果表明,黄秋葵籽油对酒精诱导的慢性肝损伤有保护作用,而这种保护作用可能与其对肠道菌群的调节作用有关。