蛋白质芯片技术应用于高通量单克隆抗体制备研究

来源 :中国科学院上海生命科学研究院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aspnet2002web
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随着功能基因组和蛋白质组学研究的不断深入,对抗体尤其是单克隆抗体的需求越来越多。在高通量的抗体制备技术方面主要有杂交瘤技术与噬菌体展示肽文库技术,而经典的单克隆抗体技术仍然是目前使用最为广泛的,易于获得高效价、高亲和力抗体的技术。本文针对杂交瘤技术筛选过程的低效率,结合蛋白质芯片技术,进行了高通量的单克隆抗体制备技术探索。 本文的主要工作内容和结果有:(1)蛋白质芯片筛选与混合克隆化技术应用于单克隆抗体制备,1个筛选周期获得了针对8种不同重组蛋白的单克隆抗体细胞株,与经典的单克隆抗体制备技术相比,节省了在筛选中的抗原用量,提高了单克隆抗体的制备效率,与玻片基质蛋白质芯片相比,微孔板蛋白质芯片更适合于高通量单克隆抗体制备体系;(2)设计与构建了可用于单克隆抗体分型鉴定的微孔板蛋白质芯片,利用该芯片进行了12株单克隆抗体和2种多克隆抗体的分型鉴定,与ELISA方法相比,蛋白质芯片的方法降低了试剂与样品的用量,提高了工作效率;(3)进行了DNA免疫制备抗体技术探索,获得了针对日本血吸虫蛋白Sj22的特异性抗血清,同时实验结果显示CpG佐剂能够有效降低质粒用量,基因免疫-蛋白加强的策略使得抗体的滴度提高了40~1280倍;(4)与上海大学通讯与信息工程学院联合研制成功细胞生长自动检测仪,实现自动采集细胞图像,实时检测细胞生长的功能。
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