水稻半乳糖脂与脂氧合酶的纯化及其互相作用

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稻叶受非亲和性稻瘟菌(Magnaporthe grisea)侵染后,引起全脂特别是糖脂含量明显减少,其中一脂氧合酶(lipoxygenase,LOX)途径被活化.为了弄清两者变化间的联系及其在水稻抗稻瘟病中的作用,该研究通过硅胶柱层析、制备性薄层层析和反相高效液相色谱,从稻叶中分离纯化了两个主要糖脂成分.对其紫外光谱和质谱分析的结果表明:两者均含有亚麻酸、甘油、半乳糖残基,结合分子量测定初步推断为单半乳糖基甘油二酯(monogalactosyldiacylglycerol, MGDG)、双半乳糖基甘油二酯(digalactosyldiacylglycerol, DGDG);通过核磁共振碳谱和氢谱分析,进一步推测MGDG的结构为1,2-二亚麻酰-3-O-β-D-半乳吡喃糖-sn-甘油.与此同时,作者还在前人工作的基础上,通过DEAE-Toyopearl、Butyl-Toyopearl、CM-Toyopearl、Sephadex G-25和FPLC Mono Q等步骤,简化了稻瘟菌诱导水稻LOX的分离纯化程序和条件,并发现其能直接作用于具有顺,顺-1,4-戊二烯结构脂肪酸的MGDG和DGDG.
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