香辛料精油的提取及其杀虫、抑菌活性研究

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植物精油是来自于芳香植物的天然产物。本论文通过超声辅助水蒸汽蒸馏法提取丁香、桂皮、八角、薄荷、香茅、花椒、香樟七种不同香辛料的植物精油,鉴定分析其主要化学成分,测定了精油对米象的杀虫活性,探讨了精油对米象的熏蒸毒杀作用机制,并综合比较了七种精油对四种食源性病原菌和三种食品腐败真菌的抑菌效果,为植物精油在抑菌、防腐、杀虫等方面的应用提供基础。(1)通过单因素和响应面优化超声辅助水蒸汽蒸馏提取丁香精油的工艺。最佳工艺条件为:粉碎粒度40目、液料比7.27 mg/L、超声时间21 min、提取时间3.4 h,在此条件下丁香精油得率为12.62%,在此工艺条件下提取桂皮、八角、薄荷、香茅、花椒、香樟精油,得率分别为3.82%、6.17%、2.35%、2.09%、6.93%、2.84%;同时,采用GC-MS分析鉴定了七种精油的主要成分,发现精油的主要成分是萜烯和酚类,且不同精油的成分和含量差异较大。(2)七种香辛料精油对米象的杀虫活性及机理研究。测定了七种香辛料精油对于米象的驱避、触杀和熏蒸作用及其杀虫机理。结果表明相同浓度下,香樟精油表现出最高的驱避效果,丁香精油的触杀作用最强,丁香和肉桂皮精油具有最高的熏蒸致死率,其次为八角精油;三种优选的精油丁香、桂皮和八角均对米象的熏蒸毒性表现出剂量和时间依赖性,其中丁香精油的熏蒸毒性最强,24 h和48 h的致死中值LC50分别为3.308和2.192μL/L空气;三种优选精油的两种主要成分熏蒸毒性测定结果表明,对于丁香精油,丁香酚是更有效的成分,24 h处理的LC50值为2.907μL/L空气,桂皮精油的主要化合物肉桂醛和水杨酸甲酯均显示出较强的熏蒸毒性,八角精油中,草蒿脑(LC50为5.421μL/L空气)比主要成分茴香脑(LC50为8.230μL/L空气)表现出更强的熏蒸毒性;分别用不同浓度和处理时间的丁香精油对米象连续熏蒸,米象体内的羧酸酯酶和P450酶活力均受到抑制作用,而精油熏蒸处理对米象GST活力呈现诱导作用。qPCR的结果表明丁香精油熏蒸导致了米象体内至少13个GST基因和5个P450基因表达量显著上升,上升的GST和P450主要来自GST epsilon和CYP6家族,而大多数酯酶基因表达量在精油熏蒸后下降,表明这些酶可能在水解植物精油次生代谢物中的发挥重要作用。(3)七种香辛料精油的抑菌活性研究。测定了七种香辛料植物精油对大肠杆菌,鼠伤寒沙门氏菌,枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌四种细菌以及三种面包腐败真菌黑曲霉、米曲霉和赭曲霉的抑菌活性。结果表明七种精油均表现出不同程度的抗菌活性,对三种真菌的MIC范围为0.0625-2 mg/mL,对四种细菌的MIC范围为0.125-4 mg/mL。其中,桂皮精油抗菌作用最强,表现出最大的抑菌圈直径(DIZ)和最低的MIC值范围,其次是丁香精油,且七种精油均能在延滞期和对数初期有效抑制细菌生长,桂皮和丁香精油能抑制三种面包腐败真菌的菌丝生长和孢子萌发,体内实验的结果表明这两种精油在面包的储藏期间具有良好的防腐效果。
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