壳聚糖复配体系的抗菌性能及应用

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壳聚糖为一种广谱抑菌剂,对多种细菌、真菌的生长和繁殖都能起到一定的杀菌效果,同时作为天然类抗菌物质,壳聚糖无毒副作用,且不易引起致病菌种的抗药性,因此比抗生素类药物具有更好的安全性,因而在生物医用领域有较广阔的应用前景。本文将壳聚糖、溶菌酶分别与醋酸氯已定、茶树油联用,以期对引起烧伤、褥疮等皮肤表面感染和肺炎等深部组织感染的重要致病菌—耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)取得良好的抑杀菌效果。  本文采用头孢西丁纸片扩散法鉴定了5株金黄色葡萄球菌是MRSA,并通过测定K-B纸片法探究了壳聚糖对MRSA的抑菌性能,甲氧西林敏感菌株(MSSA)作为质控菌株。采用对倍稀释法测定了壳聚糖对MRSA和MSSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。结果表明,5株实验菌均为MRSA,壳聚糖对MSSA和MRSA的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度相同,分别为0.025%、0.05%,壳聚糖对MRSA和MSSA均具有良好的抑菌性,且MRSA的耐药性不影响壳聚糖对其的抑菌作用。  通过杀菌率实验探究了壳聚糖复配体系对MRSA的杀菌效果,并通过荧光光谱实验初步探究复配体系的杀菌作用机制。结果表明,壳聚糖复配体系对5株临床分离的MRSA的杀菌率均在95%以上,复配体系对MRSA具有良好的杀菌作用。壳聚糖复配体系对MRSA和MSSA的杀菌率接近,印证了第2章中MRSA的耐药性并不能影响壳聚糖复配体系的杀菌作用的结论。当壳聚糖复配体系作用于MRSA时,菌体Trp荧光光谱强度发生了显著变化,且荧光光谱强度大于壳聚糖、溶菌酶、醋酸氯已定单组分和双组分单独作用。这表明了复配体系各组分在杀灭MRSA过程中起到协同增效作用。另外,也表明细胞膜可能是壳聚糖复配体系杀菌作用的一个重要靶点。  壳聚糖、溶菌酶、醋酸氯已定复配体系对引起烧伤的主要致病菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)、大肠埃细菌(E.coli)及白色念珠菌(M.albicans)均具有良好的杀菌效果,在治疗MRSA引起的难治性皮肤局部创伤和化脓感染具有良好的应用前景。抑菌性实验表明,壳聚糖对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、肺炎链球菌(S.pneumoniae)、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)和大肠埃希菌(E.coli)具有一定的抑菌效果,但敏感度相对较低;茶树油对实验菌具有非常好的抑菌性。壳聚糖、溶菌酶、茶树油复配体系对引起肺炎的主要致病菌耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、肺炎链球菌(S.pneumoniae)、肺炎克雷伯菌(K.pneumoniae)和大肠埃希菌(E.coli)具有良好的杀灭效果,即壳聚糖、溶菌酶和茶树油形成的复配体系对肺炎等机体的深部感染具有良好的应用前景。
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