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研究目的:本课题是以HepG2细胞为研究对象,在前期研究的基础上,通过制备葛花解酲方含药血清,观察葛花解醒方对人肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的作用,探讨葛花解酲方含药血清对HepG2细胞中C-myc基因表达的影响。 研究方法:实验用SD健康雄性大鼠,适应性喂养2天后,采用灌胃给药法予葛花解酲方,5天后,腹主动脉取血,2500r/Min离心20min后取上清液,56℃水浴锅温浴30分钟灭活,超净台过滤分装血清备用。15%的胎牛血清常规培养HepG2细胞,细胞计数器计数按照1*106/ml密度种植细胞,按照不同浓度(5%、10%、20%、40%)给予含药血清,MTT法检验细胞24h、48h、72h增值率;采用荧光实时定量法检测不同浓度含药血清的HepG2细胞中C-myc基因表达的情况;采用流式细胞仪法检测不同浓度含药血清的HepG2细胞的凋亡率。 研究结果:(1)与对照组相比,40%葛花解酲方含药血清24h、48h、72h细胞增值率分别从(0.67±0.07)%、(0.54±0.01)%、(0.50±0.13)%下调为(0.49±0.05)%、(0.39±0.03)%、(0.33±0.08)%;(2)4h、12h、24h、48h细胞凋亡率分别为(34.08±0.95)%、(35.78±0.47)%、(37.53±0.42)%、(38.98±0.83)%,与对照组相比,其凋亡率均增高。结论:浓度为40%葛花解酲方含药血清对HepG2细胞具有抑制其增殖促进其凋亡的作用。(3)管家基因定量结果表明,各组与对照组均有显著性差异(p<0.01),有统计学意义。目的基因定量结果表明,各组与对照组相比均有显著性差异(p<0.01);目的基因相对值与对照组相比,40%葛花解醒方含药血清与对照组相比有差异(P<0.05)。 研究结论:40%浓度的葛花解酲方含药血清可明显抑制HeoG2细胞增殖,且此浓度下HepG2细胞与对照组相比其凋亡率最高,又能够下调C-myc基因表达。