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目的:本试验通过建立犬急性胰腺炎模型,初步探索骨髓间充质干细胞分泌因子治疗犬急性胰腺炎的氧化应激和细胞凋亡的变化及其可能机制,为骨髓间充质干细胞分泌因子治疗犬急性胰腺炎提供理论依据。方法:(1)建立犬急性胰腺炎模型选取无任何病史的成年健康中华田园犬48只。其中36只采用牛黄胆酸钠(0.5ml/kg)和胰酶(3500U/kg)胰胆管逆行注射法,建立急性胰腺炎(AP)模型。剩余12只采用生理盐水造模。(2)观察骨髓间充质干细胞分泌因子治疗犬急性胰腺炎氧化应激和细胞凋亡的变化选取生理盐水造模犬6只作为A组(对照组),并将18只造模成功的试验犬随机分为B、C、D三组,每组6只。B组为模型组、C组为乌司他丁治疗组、D组为骨髓间充质干细胞分泌因子(BMSCs-F)治疗组。分别于造模前1天和治疗后1、3、5、7、10、15天,采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、内质网应激相关蛋白(CHOP)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)相应浓度水平,对BMSCs-F治疗AP氧化应激和细胞凋亡的影响进行分析。(3)骨髓间充质干细胞分泌因子治疗犬急性胰腺炎胰腺组织HO-1的表达变化选取健康犬6只作为A组(对照组),并将18只造模成功的试验犬随机分为B、C、D三组,每组6只。B组为模型组、C组为乌司他丁治疗组、D组为骨髓间充质干细胞分泌因子(BMSCs-F)治疗组。在治疗1、5、15天后取两只试验犬胰腺样本制作石蜡切片,并通过免疫组化法观察HO-1的表达情况,计算HO-1的累积光密度(IOD),进一步分析BMSCs-F治疗AP氧化应激和细胞凋亡的可能机制。试验结果:(1)犬急性胰腺炎模型建立结果造模24h后,试验犬出现呕吐、腹痛、食欲不振等症状,血清淀粉酶、血清脂肪酶超过术前5倍以上。造模成功。(2)骨髓间充质干细胞分泌因子治疗犬急性胰腺炎氧化应激和细胞凋亡的变化BMSCs-F组SOD值在治疗后1天开始下降,3天达到最低值,之后缓慢上升,在治疗后15天仍未接近对照组指标;乌司他丁组SOD值在治疗后1天开始下降,5天达到最低值后缓慢上升,在治疗后15天仍未接近对照组指标;BMSCs-F组与模型组比较,SOD在治疗后第5天显著上升(P<0.05);乌司他丁组与模型组比较,SOD在治疗后第7天呈现极显著上升(P<0.01);治疗后10天,BMSCs-F组SOD值极显著高于较乌司他丁组(P<0.01)。BMSCs-F组和乌司他丁组的MDA值在治疗后1天开始上升,5天达到峰值,之后逐渐下降,在治疗后15天仍未接近对照组指标;BMSCs-F组与模型组比较,MDA在治疗后第3天呈现极显著下降(P<0.01);乌司他丁组与模型组比较,MDA在治疗后第5天显著下降(P<0.05),第7天呈现极显著下降(P<0.01);治疗后10天,BMSCs-F组MDA值极显著低于乌司他丁组(P<0.01)。BMSCs-F组CHOP值在治疗后1天开始上升,3天达到最高值,之后缓慢下降,在治疗后15天仍未接近对照组指标;乌司他丁组CHOP值在治疗后1天开始上升,第5天达到最高值后缓慢下降,在治疗后15天仍未接近对照组指标;BMSCs-F组与模型组比较,CHOP在治疗后第1天呈现极显著减少(P<0.01);乌司他丁组与模型组比较,CHOP在治疗后第5天显著减少(P<0.05),第7天极显著下降(P<0.01);BMSCs-F组CHOP值较乌司他丁组于治疗后7天显著下降(P<0.05),第10天极显著下降(P<0.01)。BMSCs-F组和乌司他丁组的Caspase-9值在治疗后1天开始上升,5天达到最高值,之后逐渐下降,在治疗后15天仍未接近对照组指标;BMSCs-F组与模型组比较,Caspase-9在治疗后第3天显著下降(P<0.05),第5天呈现极显著下降(P<0.01);乌司他丁组与模型组比较,Caspase-9从治疗后第7天显著差异(P<0.05),第15天极显著下降(P<0.01);BMSCs-F组Caspase-9值较乌司他丁组于治疗后5天显著下降(P<0.05),第10天极显著下降(P<0.01)。(3)骨髓间充质干细胞分泌因子治疗犬急性胰腺炎HO-1的表达变化BMSCs-F组和乌司他丁组的IOD在治疗后1天开始上升,5天达到峰值,之后开始下降,在治疗后15天仍未接近对照组指标;BMSCs-F组和乌司他丁组与模型组相比,IOD在治疗后5天显著上升(P<0.05);BMSCs-F组IOD较乌司他丁组于治疗后5天显著升高(P<0.05),第15天极显著升高(P<0.01)。结论:(1)通过副胰管逆行注射牛黄胆酸钠(0.5ml/kg)和胰酶(3500U/kg)成功建立犬急性胰腺炎模型。(2)BMSCs-F可能是通过有效降低胰腺氧化应激损伤,减少细胞凋亡来达到良好的急性胰腺炎治疗效果。(3)BMSCs-F有效降低胰腺氧化应激损伤,减少细胞凋亡,可能与上调HO-1的表达有关。