人免疫缺陷病毒-1（human immunodeficiency Vires，HIV-1）自20世纪80年代发现以来，已在全球造成大约3340万人感染艾滋病，其中去年新增感染者270万人，200万人死于与艾滋病相关的疾病。截至2009年10月底，我国累计报告艾滋病病毒感染者和病人319877例，其中艾滋病病人102323例；报告死亡49845例，艾滋病疫情呈上升趋势，存在疫情进一步蔓延的危险。越来越多的研究表明HIV抗原特异性的CD8+T细胞免疫应答在清除病毒感染的细胞，降低血液中的病毒载量起着重要的作用，因此研究诱导T细胞免疫反应的HIV-1疫苗具有很好的现实意义，可以达到延缓感染者发展为AIDS的进程、减少HIV传播、控制艾滋病流行范围等目的。　　 HIV-1 B亚型和B/C重组亚型病毒是在中国流行较广的两种病毒亚型，具有分布范围广，新增感染人数多的特点。我们拟通过将表达B亚型和B/C重组亚型HIV抗原的多种载体疫苗联合应用来诱导高水平并且持久的HIV特异性细胞免疫反应。　　 本研究中采用表达HIV-1 B/C重组亚型gag-env-pol基因的DNA和重组痘病毒疫苗（rMVA）及表达HIV-1B亚型gag基因的DNA疫苗和重组腺病毒疫苗（rAdV）在小鼠体内联合免疫，比较了两种疫苗联合免疫与三种疫苗联合免疫所诱导的Gag特异性细胞免疫和体液免疫反应的水平。实验中采用ELISpot方法检测细胞免疫反应，ELISA方法检测血清中P24抗原特异性的IgG抗体的滴度。结果显示，两种亚型的DNA疫苗与rMVA疫苗联合免疫的细胞免疫反应都明显低于与rAdV疫苗联合免疫组，后者是前者的2～8倍。rMVA与rAdV疫苗联合免疫的细胞免疫反应水平与免疫顺序有关，先免疫rMVA疫苗的方案优于先免疫rAdV疫苗的方案。三种疫苗联合免疫的方案DNA/rAdV/rMVA与DNA/rMVA/rAdV跟上述两种疫苗联合免疫的方案相比，细胞免疫反应水平明显增强，而且rMVA和rAdV疫苗加强免疫的先后顺序对免疫效果没有影响。在体液免疫方面，各组均能诱导很强的p24抗原特异的IgG抗体。　　 将rMVA疫苗免疫已经接受过DNA+rSeV+rADV疫苗免疫及DNA+rAdV+rSeV疫苗免疫的恒河猴，结果所有接种疫苗的恒河猴均产生了针对B亚型Gag肽库的特异性细胞免疫应答和P24特异性抗体反应。在rMVA疫苗初次免疫后的5～8周间，细胞免疫反应达到一个反应高峰，在之后的十几周内都能持续一个相对较高的水平，说明不同载体疫苗的联合免疫可以减小机体对载体的免疫应答，更久地维持针对病原抗原的细胞免疫应答，这对抑制感染者体内病毒的扩增有积极的意义。同时也能在恒河猴体内诱导较强的体液免疫反应，峰值产生的时间较之前免疫其他疫苗时早，这可能与之前免疫过含gag基因的疫苗有关，但是这种特异性体液免疫反应持续的时间较短。rMVA疫苗初次免疫后30周进行第二次MVA疫苗的加强免疫，4周后又检测到了比初次免疫更强的Gag特异性细胞免疫反应，目前仍在监测中。　　 综上所述，多种疫苗联合应用能多次诱导特异性细胞免疫反应，并且可持续较长时间。这种策略与HARRT治疗联合应用在治疗HIV感染及艾滋病中具有一定的前景。