大鼠局灶性脑缺血N-cadherin mRNA转录及蛋白表达和脐血间充质干细胞移植的研究

来源 :中南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chris_1988
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第一部分大鼠局灶性脑缺血再灌注N-cadher in mRNA转录及蛋白表达背景和目的急性缺血性脑血管病是一种高发病率、高致残率的临床常见病.越来越多的证据已经证明患病后机体发生了一系列自我修复过程.包括神经细胞发生、突触再生,神经环路重建等可塑性变化.N-cadherin作为钙依赖性细胞粘附分子亚家族的一个成员,于个体发育阶段在控制机体形态发生方面担负着重要的角色.它涉及神经元间的粘连、神经细胞的分化、迁移、神经突起的外生、轴突成束、组织结构的稳定性.它是否也参与了急性缺血性脑血管病发病后患病机体的自我修复尚未见有国内外文献报道.该研究的目的是为了观察大鼠局灶性脑缺血损伤后脑组织神经细胞内N-cadherin mRNA转录及N-cadherin蛋白表达水平的变化.方法采用线栓法制作成年SD大鼠大脑中动脉供血区局灶性缺血再灌注模型,采用原位杂交染色及免疫组织化学染色技术观察缺血再灌注后不同时间点脑组织不同部位神经细胞内N-cadherinmRNA的转录及蛋白表达.第二部分 大鼠局灶性脑缺血后脐血间充质干细胞移植的研究背景与目的干细胞移植治疗脑血管病日益受到人们的重视.干细胞来源多取自骨髓间充质干细胞,局部脑内注入是主要途径.考虑骨髓间充质干细胞来源有限,反复多次脑内注入移植干细胞临床上是病人难以接受的,而脐血间充质干细胞与骨髓间充质干细胞特征相似,体外培养诱导后可向神经细胞方向分化,因而我们决定以脐血间充质干细胞作为干细胞来源,从静脉途经注入,观察大鼠大脑中动脉阻断后脐血间充质干细胞在脑组织内的分布及分化情况.方法通过线栓法制作成年雄性SD大鼠MCAO模型.模型成功后于缺血再灌后1天、7天从静脉注入被标记好的3×10<6>个脐血间充质干细胞.于注射后14、28天将大鼠处死并制作脑组织切片,用荧光显微镜观察脑组织切片上用Dapi标记过的脐血间充质干细胞的分布;采用免疫组化双重标记染色观察经Brdu标记过的脐血间充质干细胞在脑组织中的分化情况.结论1、脐血间充质干细胞静脉注射后能向缺血脑组织中迁移并部分分化成神经细胞.2、静脉注射脐血间充质干细胞治疗大鼠局灶性脑缺血可能有助于神经功能的恢复.
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