萝卜花芽分化、抽薹与内源激素和DNA甲基化关系的初步研究

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ARMYUN1981
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花芽分化是植物成花的基础,抽薹在花芽分化及发育过程的中途便开始,与花芽分化有不可分的关系,关于成花机理方面的研究不断深入,植物激素控制成花的研究越来越多,近年来关于DNA甲基化与植物生长发育转变的研究日益成为关注的焦点。 本研究采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定了三个春萝卜品系(04-358,04-565,04-566)在现蕾抽薹过程中顶端生长点处嫩叶中几种主要内源激素GA4、IAA、iPA和ABA含量的变化情况。发现在现蕾抽薹过程中,GA4含量在现蕾点存在明显的峰值,表明GA4与现蕾抽薹密切相关;内源ABA含量变化与GA4变化趋势基本一致;抽薹过程中叶片中IAA含量相对较低;iPA含量在现蕾期逐步增加,至抽薹中后期出现一高峰值。激素平衡比单一激素对萝卜抽薹开花的影响更大,研究发现iPA/ABA值增大,GA4/iPA和GA4/IAA值变小有利于花芽分化后植株的抽薹开花。 对萝卜基因组DNA的MSAP关键步骤进行了优化并应用于抽薹和花芽分化过程中甲基化样式分析。在优化体系的基础上,使用18对引物分析了春萝卜品种NAULbsg-2003-6现蕾抽薹过程中DNA甲基化水平的变化情况,结果表明在未现蕾—现蕾—抽薹过程中基因组DNA甲基化水平先降低,随着花茎的伸长DNA甲基化水平又逐渐上升,各个时期,CCGG内侧胞嘧啶完全甲基化程度均高于半甲基化的程度。 对‘短叶13’在花芽分化过程中基因组DNA甲基化模式分析,表明:种子基因组DNA甲基化水平最高,达到30.2%,而在花芽分化过程中,叶片DNA的甲基化水平逐渐上升(14.7%<16.6%<16.9%<17.5%),同时发现许多去甲基化和重新甲基化位点,部分扩增谱带的强弱揭示了在萝卜中存在的特异重复序列。分析结果表明,MSAP技术在检测萝卜花芽分化过程中5-mC的程度具有敏感性高和特异性强等优点。 利用去甲基化试剂5-azaC结合低温处理(4.0℃,15d)萝卜幼苗,并测定了幼苗处理后萝卜在生长过程中某一时期的形态指标和现蕾抽薹开花状况。结果表明,5-azaC单独处理不足以代替低温春化作用;在春化条件下,低浓度5-azaC促进萝卜开花,且与低温促进开花的作用具有加成性;但高浓度时却抑制开花,甚至对萝卜的生长发育造成严重的伤害。
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