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T型钙通道是一类低电压（-60mV）激活钙通道，包括三个亚型：CaV3.1、CaV3.2、CaV3.3。在中枢神经中T型钙通道引发起搏点活动和低阈值神经冲动。外周神经系统T型钙通道主要存在于中小直径的DRG神经元中，且主要是CaV3.2亚型。至今发现多种疾病都与T型钙通道的功能状态异常有关，如癫痫、疼痛、心脏病、糖尿病、高血压和癌症等。T型钙通道有着重要的生理病理学意义，其分子调节机制一直是很多实验小组研究的热点。由于缺乏其特异性开放剂与阻断剂，T型钙通道分子调节机制研究进展缓慢。近几年随着其特异性开放剂与阻断剂的发现，对于T型钙通道的分子机制的研究报道越来越多，并取得了很大进展。但目前对于T型钙通道的调节机制仍有许多未明之处。了解T型钙通道的分子调节机制将为临床预防与治疗各种T型钙通道功能异常所导致的疾病提供理论支持。疼痛目前仍然是困扰人们身心健康的一大难题，给人们的正常生活带来诸多不便。离子通道与疼痛的关系早已成为人们研究的热点。研究发现，T型钙通道功能异常与各种神经性疼痛与炎性疼痛有着密切关系。但目前尚未见T型钙通道功能调节剂对疼痛行为研究的报道。研究将围绕T型钙通道功能调节机制及其在疼痛中的作用展开。第一部分P物质对T型钙通道的调节及其分子机制的研究目的：研究P物质对T型钙通道的作用并寻找其调节作用的信号通路。包括：（1）研究P物质对表达的CaV3.2通道电流的调节作用。（2）研究P物质对DRG神经元中T型钙通道电流的调节作用。（3）寻找介导P物质对T型钙通道作用的信号转导分子。方法：利用打孔全细胞膜片钳技术进行研究。结果：（1）打孔全细胞膜片钳实验结果表明，1μM SP可显著抑制表达在HEK293细胞中CaV3.2钙电流（共表达NK-1受体），抑制率为30.2±6.8%（P＜0.05，n=13）且其抑制作用可被还原剂1mM DTT恢复至基础电流的99.3±5.7%，n=12。（2）全细胞膜片钳实验结果表明，1μM SP可显著抑制DRG神经元中T型钙电流，抑制率为25.9%±5.3%（P＜0.05，n=11)。且抑制作用可被1mMDTT恢复至基础电流的105.7±11%(n=8)。SP对高电压激活（HVA）钙通道功能无影响。（3）H2O2(300μM)可抑制过表达系统中CaV3.2钙通道电流，抑制率为9.4±1.7%（P<0.05， n=5）。其抑制可以被DTT洗脱（电流恢复至抑制前的102.1±1.3%，n=5）。但H2O2对T型钙通道的抑制作用明显小于SP所产生的抑制作用。（4）Antimycin A(1μM)灌流给药可使表达系统中CaV3.2钙电流增大到基础电流的142.1±7.6%（P＜0.05，n=8），但DTT不能使电流恢复至基础电流水平。（5）SP不能抑制HEK293细胞中表达的突变体CaV3.2（H191Q）（共表达NK-1受体）电流（n=8）。结论：运用电生理膜片钳手段发现SP选择性抑制T型钙通道电流，而对高电压激活钙通道无作用。这种抑制作用的信号分子可能是细胞内的ROS，其作用关键位点位于CaV3.2的191位组氨酸。第二部分T型钙通道激动剂ST101对CaV3.2电流和疼痛行为的影响目的：观察大鼠右后脚掌注射T型钙通道开放剂ST101对动物疼痛行为的影响。具体研究（1）T型钙通道开放剂ST101对表达的CaV3.2钙电流的作用，并根据EC50确定动物痛实验中所用药物浓度。（2）ST101在自发性疼痛、热痛和机械刺痛中的作用。方法：全细胞膜片钳技术；大鼠自发性疼痛、热痛和机械刺痛模型。结果：（1）ST101可以增大过表达于HEK293细胞中的CaV3.2钙电流，其作用呈浓度依赖性，EC50为8.7±1.4nM。100nM的ST101到达最大效应，可使CaV3.2钙电流增大42.4±4.2%（n=5）。（2）整体动物行为学实验结果表明，足掌部注射ST101不能引起大鼠脚掌自发性疼痛，动物舔、抬、啃脚的总时间分别为：溶剂（saline）(25μl)，5.9±1.7s； ST101(20μM，25μl)，15.3±5.1s；缓激肽（BK）(200μM，25μl)100.3±17.9s（P=0.09，n=13）。（3）在热痛与机械刺痛实验中，足掌部注射相同量的ST101也不能使动物脚掌痛觉增敏。机械刺痛阈分别为：ST101组给药前为68.4±7.9g，给药后为59.3±4.8g（P＞0.05，n=5）；对照组（saline组）给药前为60±0g，给药后为53.2±6.8g（P＞0.05，n=5）。热痛实验结果为：ST101组给药前为36.3±3.2s，给药后为38.6±2.0s（P＞0.05，n=5）；对照组（saline组）给药前为38.9±0.9s，给药后为38.6±0.6s（P＞0.05，n=5）。结论：本部分实验结果表明，ST101可增大过表达系统中的CaV3.2电流。但在动物痛实验中并引起大鼠自发性疼痛，也未导致热痛与机械痛痛觉增敏。