【摘 要】
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端粒是线性染色体末端由端粒DNA及其结合蛋白组成的保护性结构,在维护基因组稳定性和维持端粒周围基因的转录沉默等方面发挥着重要的作用。在酿酒酵母细胞中,野生型细胞的端粒D
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端粒是线性染色体末端由端粒DNA及其结合蛋白组成的保护性结构,在维护基因组稳定性和维持端粒周围基因的转录沉默等方面发挥着重要的作用。在酿酒酵母细胞中,野生型细胞的端粒DNA主要由端粒酶延伸(复制),端粒酶缺失细胞的端粒DNA主要由同源重组途径延伸。以往的研究表明,野生型细胞中,端粒酶优先挑选短的端粒进行延伸。然而在端粒酶缺失细胞中,同源重组途径是否优先选择短端粒进行延伸还不清楚。我们采用了端粒从头延伸系统来研究这一问题。我们发现端粒酶缺失细胞利用同源重组途径优先延伸短端粒。 我们还利用端粒从头延伸系统研究了端粒异染色质从头组装的分子动态过程。通过分析新端粒附近TRP1报告基因的染色质动态变化,我们发现当300 bp长的端粒重复序列被插入到染色体内部,其周围环境会出现很明显的异染色质特征;而如果插入的是81 bp的短端粒序列,周围环境则更类似于常染色质。这一现象暗示我们,被插入的端粒序列长度一定程度上能够决定周围染色质的状态。当81bp的短端粒序列被诱导成为一个新生的染色体末端,原本的常染色质特征会迅速消失,并且逐渐展现出异染色质的特征,这种常异染色质的转变不依赖于端粒酶。我们还发现yKu蛋白对于末端异染色质的从头形成过程有促进作用,但对染色体内部TG重复序列所建立的稳定异染色质结构没有贡献。
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