苏云金芽孢杆菌NU-1、NU-2毒力提高与保护的研究

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该实验研究了苏云金杆菌NU-1、NU-2毒力的提高与保护.研究了NU-1、NU-2的菌种培养、种子培养,筛选了适宜的培养条件;出于工业化生产的目的,利用正交方法优化筛选了发酵培养基,并测定了晶体蛋白含量.结论为:菌种培养72 h,采用1号种子培养基,4%接种量,种子培养7h,NU-1在2号、10号发酵培养基上,NU-2在4号发酵培养基上发酵结果最高.NU-1在2号培养基上发酵40h,菌数达85.5×10<8>个/ml,pH8.2,晶体蛋白含量为6.320mg/ml,在10号培养基上的生长情况与其相似;NU-2在4号培养基上发酵42h,菌数达到78.0×10<8>个/ml,pH8.1,晶体蛋白含量为6.085mg/ml.为了进一步研究NU-1、NU-2的生长情况,还测定了其生长和pH曲线.筛选出两种添加剂,试验了它们对Bt发酵的影响.结果表明:添加剂1号和添加剂2号都能提高Bt的发酵菌数并缩短发酵时间.采用不同防腐剂处理Bt制剂,研究了防腐剂的防腐效果.试验结果表明防腐剂1号,2号都是良好的防腐剂,防腐剂1号用量0.15%,防腐剂2号用量0.04%就可取得理想的防腐效果.用SDS-PAGE、酶活测定、电镜观察等方法研究了紫外线照射对Bt的破坏,并初步探寻了保护方法.结果表明:紫外线照射能破坏晶体蛋白的表面结构和形态,照射24h后,酶活性几乎全部丧失,SDS-PAGE显示晶体蛋白几乎完全不溶.添加0.5%苋菜红做保护剂,再经紫外线照射后,酶活降低较小,电泳显示伴孢晶体碱溶产生的135KD和65KD原毒素蛋白几乎无变化,证明染料类是较好的保护剂.
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