【摘 要】
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该文利用脉冲凝胶电泳(CHEF)系统首次确定了被孢霉属中产GLA的深黄被孢霉AS3.3410(Mortierellaisabellina AS3.3410)及其诱变株M
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该文利用脉冲凝胶电泳(CHEF)系统首次确定了被孢霉属中产GLA的深黄被孢霉AS3.3410(Mortierellaisabellina AS3.3410)及其诱变株M<,6-22)、MH<,23>以及不产GLA的拉曼被孢霉AS3.3413(Mortierella ramanniana AS3.3413)和葡酒色被孢霉AS3.3414(Mortierellavinacea AS3.3414)的染色体数目及基因组大小.该文在研究深黄被孢霉基因组结构的基础上,进一步对γ-亚麻酸代谢过程中的关键酶——△<6>-脂肪酸脱氢酶在基因水平上进行了研究.△<6>-脂肪酸脱氢酶是以亚油酸(C18:2△<9,12>为底物,在C<,6>和C<,7>位之间脱氢 形成γ-亚麻酸(C18:3△<6,9,12>),克隆到该基因对提高GLA产量,进行基因工程菌的构 建和转基因植物具有重大意义,该论文将已发表的高等植物、动物、蓝细菌、真菌的△<6>-脂肪酸脱氢酶序列进行同源性比较,发现△<6>-脂肪酸脱氢酶具有三个组氨酸保守区,但与其它位点的脂肪酸脱氢酶不同的是,△<6>-脂肪酸脱氢酶在N端特有细胞色素b<,5>(Cytb<,5>)区,因此,研究人员根据Cytb<,5>区的HPGG和组氨酸保守区ⅢQIEHHLFP的氨基酸序列 设计引物,提取深黄被孢霉的总RNA,进行RT-PCR扩增,将扩增出的DNA片段进行连接、转化、最后对重组质粒进行酶切鉴定和测序.该论文在研究深黄被孢霉生产GLA的发酵工艺基础 上,对该菌株进行了电泳型分析,首次报道了其染色体数目和基因组大小,并以产γ-亚麻 酸的关键酶——△<6>-脂肪酸脱氢酶基因进行了克隆和序列分析,为更深入细致地研究被 孢霉中脂肪脱氢酶系统的分子遗传学,揭示产生GLA的调控机制打下了坚实的基础.
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