基于金属纳米酶的比色分析方法研究

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纳米酶是指具有酶学特性的纳米材料,是目前人工模拟酶领域中的研究热点。与天然酶相比,纳米酶具有价格便宜、制备简单、稳定性好及易于表面修饰等优点。因此,纳米酶被研究者广泛地应用于临床诊断、纳米医药、环境检测等领域。然而,目前开发的纳米酶依然存在催化活性较低及特异性较差等问题。提高纳米酶的催化活性和底物亲和性是当前研究的热点。本论文研究了不同离子、分子对金属纳米酶催化活性和底物亲和性的影响,发现某些分析物对纳米酶的催化活性有明显的增强或抑制作用。例如,铅离子可以增强金纳米簇的类过氧化物酶活性;硫离子可以抑制铜纳米簇的类过氧化物酶活性;肝素或肝素酶可以增强或抑制金纳米簇的类过氧化物酶活性。根据这些分析物对纳米酶的增强或抑制作用,建立了三种检测目标分析物的比色新方法。主要成果如下:1、铅离子可以增强金纳米簇的类过氧化物酶活性。铅离子存在时,聚集状态的金纳米簇对过氧化物酶底物3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)的催化活性增强了近10倍。基于这一发现,开发了一种简单可靠的比色检测铅离子的新方法。2、硫离子可以抑制铜纳米簇的类过氧化物酶活性。加入硫离子后,铜纳米簇对TMB催化氧化H2O2的活性显著降低。基于此发现,建立了一种快速比色检测硫离子的新方法。该比色法的检测限为0.5μM。该方法具有较好的选择性,并成功地应用于环境水样中硫离子的定量分析。3、肝素可以增强金纳米簇的类过氧化物酶活性。加入肝素后,金纳米簇对过氧化物酶底物TMB的催化活性增强了25倍。加入肝素酶后,肝素被分解,金纳米簇的类过氧化物酶活性降低。基于此现象,开发了一种比色测定肝素和肝素酶的分析新方法。此方法也被应用于稀释血清样品中肝素和肝素酶的检测。
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