广谱拮抗菌WB3的激光诱变筛选与复合菌肥的生物防治应用

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目的:鉴定细菌WB3的种属并确认其拮抗范围;通过激光对拮抗菌WB3进行诱变筛选,以筛选出拮抗能力得到有效提高并可稳定遗传的突变菌株;使其与另一株具有广谱拮抗性的枯草芽孢杆菌QM3进行混合培养发酵,将发酵菌液与生化黄腐酸菌肥配制成可应用于田间病害防治的复合生物菌肥。方法:通过形态学观察、生理生化实验检测以及16SrRNA序列分析对已分离得到的WB3进行菌种鉴定;做WB3针对12株常见植物病害的平板拮抗实验来初步确认其拮抗范围;采用He-Ne激光照射具有拮抗能力的枯草芽孢杆菌WB3,同时以番茄早疫病菌作为指示菌,以期获得诱变效果最佳且能稳定遗传的正向突变菌株;尝试将QM3与WB3进行混合培养,包括平板交叉划线、液体摇瓶培养等方法,观察混合培养下的细菌总数以及拮抗能力的变化;通过改进玉米粉液体培养基来摸索适合二者混合培养的工业发酵培养基;将混合拮抗菌液与生化黄腐酸菌肥进行复配获得复合生物防治菌肥,并进行田间应用试验来检验其防治效果。结果:WB3经鉴定是一株枯草芽孢杆菌,且对12株植物致病真菌均具有拮抗效应,是一株广谱拮抗细菌;30min He-Ne激光辐照对WB3有明显的诱变作用,所筛选出的最佳突变株WB3’对指示菌的拮抗能力有显著的提高并能稳定遗传;QM3与WB3’可以较好地共同生长,且混合拮抗菌发酵液在拮抗能力方面出现了互补提高的现象;复合生物菌肥相较于化学农药,在番茄等植物大田试验的防病、治病以及促生等效应方面具有全面优势。结论:运用He-Ne激光诱变方法可以提高WB3的拮抗能力;广谱拮抗菌WB3与QM3能共存于同一生长环境,且二者在生长与拮抗两方面均出现互相促进的效应;复合生防菌肥在实际应用中的防效和肥效均令人满意。
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