梨属植物种间杂交容易获得可育的后代,在长期的驯化栽培中,不仅形成了类型多样的品种,而且品种间的亲缘关系也较为复杂。因此在遗传上进行分类鉴定和亲缘关系的探讨不仅对揭示物种的演化有重要意义,且有利于指导梨育种等工作。本研究采用AFLP技术对收集到的34个梨品种进行分子水平的亲缘关系分析。首先采用改良CTAB法获得了高质量的梨DNA,用于AFLP的双酶切。然后对梨AFLP预扩增和选择性扩增体系进行优化,建立最佳反应体系,筛选出适合梨AFLP分析的随机引物并进行扩增。最后,对样品的AFLP图谱及数据进行统计分析,结果如下:1,本实验采用改良CTAB法,从梨幼叶中提取DNA,产率较高,OD₂₆₀/OD₂₈₀为1.79-2.01;这些DNA原液均能被限制性内切酶EcoRⅠ充分消化,说明所提取的DNA纯度高,所含抑制内切酶的各种污染很少。2,采用5因素4水平正交实验,优化了的梨AFLP预扩增和选择性扩增体系。3,采用优化后体系,对30对AFLP引物组合进行筛选,经过3次重复,筛选出了6对扩增条带多、多态性高的引物组合。4,利用筛选出的6对选择性扩增引物,对34个梨进行了AFLP分析。6对引物共扩增225个遗传位点,多态位点为210条,多态性比例为93.33%。采用UPGMA聚类,将34个材料分为5个大类。5,分析了AFLP标记用于检测芽变的可行性。讨论了日本梨与中国梨的亲缘关系,支持前人关于“日本现在栽培梨品种的祖先是从古代中国大陆和朝鲜半岛传到日本的”的结论。