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肥胖是胰岛素抵抗和2型糖尿病的主要危险因素。近年来肥胖和2型糖尿病是慢性炎症性疾病的学说备受关注,许多研究表明肥胖和2型糖尿病患者血清中多种炎症介质和炎症标志物的分泌增加。表达和分泌增加的炎症因子可以通过干扰胰岛素信号转导途径引起胰岛素抵抗,还可以直接损伤胰岛β细胞。因此,抗炎治疗正成为治疗肥胖、胰岛素抵抗和2型糖尿病的重要手段。中医药用于2型糖尿病及其相关疾病的治疗已经有数千年的历史。研究表明,许多传统方药都能显著改善患者的症状和糖脂代谢紊乱,而从有效方药中探寻具有抗糖尿病作用的活性成分一直是国内外研究的热点。小檗碱是中药黄连(Coptis chinensisFranch)的主要有效成分,一系列临床试验和动物及细胞实验均表明它具有降低血糖、改善异常的脂质代谢、增加胰岛素敏感性等作用,是物美、价廉的降糖调脂药。
本文结合目前国内外最新的研究成果,利用体内外实验相结合的方法,探索小檗碱对肥胖和胰岛素抵抗相关炎症因子的调节作用及其可能的分子机制。主要研究结果如下:
1.模型组(BM组)小鼠血清TNF-α、IL-6含量高于正常组(NC组),经小檗碱治疗后,无论是小檗碱低剂量组(BL组)还是小檗碱高剂量组(BH组)TNF-α、IL-6含量均下降,与BM组比较有显著性差异,而各组之间脂联素未见明显差异;BH组小鼠肝脏和附睾脂肪组织中IKK-β的表达水平与NC组和BM组未见明显改变,但IKK-β(ser181)的磷酸化水平则明显下降;此外,小檗碱能够明显改善肥胖小鼠的糖耐量,降低体重和附睾脂肪含量。
2.在分化成熟的3T3-L1脂肪细胞中加入10umol/L的小檗碱干预24小时后小檗碱降低基础状态下3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-6的分泌,与不加小檗碱干预的组别(N组)比较差异具有显著性,但是它没有增加脂联素的分泌。
3.实时荧光定量PCR(QRTPCR)检测结果显示小檗碱降低基础和TNF-α干预后3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-6、Leptin、MCP-1的表达,增加Visfatin的表达,没有增加脂联素的表达;Westem blotting结果显示小檗碱降低基础和TNF-α干预后3T3-L1脂肪细胞IKK-β(ser181)的磷酸化水平,但是对IKK-β、NF-κd3 P65蛋白的表达没有影响;激光共聚焦显微镜下观察到小檗碱减少TNF-α干预后3T3-L1脂肪细胞NF-κB P65蛋白向细胞核内的转位。
由此可见,小檗碱可能通过降低IKK-β(set181)的磷酸化水平,抑制NF-κd3P65蛋白向细胞核内的转位发挥调节炎症因子表达和分泌。