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目的:研究葛根素对肺缺血再灌注损伤及其细胞凋亡的干预效应与作用机制。
方法:1.实验分组:健康日本大耳白兔70只,随机分为:(1)对照组(C组),动物10只,麻醉后左侧开胸,游离肺门,过阻断带,观察4小时后抽血、取肺。(2)缺血再灌注组1小时(IR1h)、3小时(IR3h)和5小时(IR5h)组,每组动物10只,手术同C组,结扎阻断带,缺血1小时,开放阻断带,分别再灌注1、3、5小时。(3)葛根素1小时(Pur1h)、3小时(Pur3h)和5小时(Pur5h)组,每组动物10只,缺血前5分钟前,静脉给予葛根素注射液(30mg/kg)。C组和IR各组则静脉给予等量生理盐水。余同IR组。2.采用单侧兔肺原位缺血再灌注模型。3.实验结束取肺组织测湿/干重比(W/D);检测血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量;采用原位末端标记法检测肺组织凋亡指数(AI);免疫组化学、原位杂交测定肺组织Fas、FasL的表达;光镜、电镜观察肺组织形态学结构变化,并测定肺损伤组织学定量评价指标(IQA)。
结论:1、细胞凋亡可能在肺缺血再灌注损伤中起重要作用;2、缺血再灌注可使肺组织Fas、FasL表达明显上调,Fas/FasL通路可能为再灌注损伤肺细胞凋亡的主要途径之一;3、葛根素可能通过抗氧化、保护内皮细胞等作用,直接或间接抑制Fas/FasL系统诱导的细胞凋亡,从而保护缺血再灌注肺组织。