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病毒性心肌炎（Viral myocarditis，VMC）是小儿心血管系统中最常见疾病，临床表现轻重不一，大多病人临床表现较轻，治疗效果较好，但有部分患儿发展成为慢性心肌炎，甚至进展为扩张型心肌病，病死率高，VMC是儿童后天性心脏病的主要病因之一，严重威胁着少年儿童的身体健康。近年来，VMC的发病呈现增高趋势，因此，引起学术界的普遍关注。VMC的发病机制至今尚未完全清楚，但普遍认为与病毒的直接损害、免疫机制、脂质过氧化介导的心肌损伤、心肌细胞凋亡及心肌纤维化有关，其中细胞因子起了非常重要的作用。目前对VMC的治疗没有特异性的治疗药物。核因子相关因子2(NF-E2-related factor2, Nrf2)是近年来新发现的一个转录因子，在心血管系统中表达稳定，研究表明Nrf2的目的基因在心血管系统疾病中具有保护作用。因此，我们推测，Nrf2可能参与了VMC的发生、发展过程。中药在VMC中越来越受到重视，葛根素(puerarin, Pue)普遍应用于成人心血管疾病的治疗，但它对心血管起保护作用机理尚不完全清楚，在儿童VMC中的临床应用经验相对较少，剂量也没有统一的规定。本研究主要针对Nrf2在VMC中抗氧化、抗凋亡、抗纤维化方面进行研究，并探索Pue在这些方面所起的作用，以及大剂量应用导致的不良反应。将250只BALB/c纯种4周龄雄性小鼠，体重15±2g，随机分组对照组（20只），VMC组（30只），Nrf2激活剂5,6-二氢-1,2-二硫杂环戊烯-3-硫酮(5,6-dihydrocyclopenta-1,2-dithiole-3-thione,CPDT)25μM组（20只）、50μM组（20只）、75μM组（20只），不同剂量Pue组：5mg.kg-1（20只）、15mg.kg-1组（20只）、45mg.kg-1组（20只）、30mg.kg-1组（20只）、100mg.kg-1组（30只）、300mg.kg-1组（30只），用柯萨奇B3型病毒（CVB3），通过VMC经典造模方法进行造模。分别在实验第0、4、7、14、28天采血、杀鼠，留取心肌组织。采用流式细胞术检测小鼠心肌细胞的凋亡情况，应用Real-Time PCR法检测Nrf2mRNA、HO-1mRNA、Fas mRNA、TGF-β1mRNA的水平及用Western blot法检测Nrf2、 HO-1、Fas、TGF-β1的蛋白表达情况。结果发现，Nrf2mRNA及其蛋白在各组均有表达，随着激活剂CPDT浓度及Pue给药剂量的增加，表达增强，在一定范围内呈浓度或剂量依赖性。给予大剂量Pue(≥100mg.kg-1)时，剂量依赖关系被打破，Nrf2呈现持续升高或不降低状态；CPDT及Pue组HO-1的转录及蛋白表达明显升高，且与Nrf2呈正相关。在一定Pue剂量梯度（≤45mg.kg-1）下，HO-1的转录及蛋白表达呈剂量依赖性,给予大剂量Pue(≥100mg.kg-1)时，剂量依赖关系被打破；CPDT及Pue组心肌细胞凋亡数减少，Nrf2与Fas呈负相关；Pue100mg.kg-1组、Pue300mg.kg-1组与VMC组比较无明显差异(P＞0.05)，提示给药剂量增加，治疗作用并没有相应增强；CPDT及Pue组中TGF-β1在一定的浓度或剂量梯度下，随着浓度/剂量的增大，TGF-β1表达降低，Nrf2与TGF-β1呈负相关；当Pue剂量增大到一定程度(≥100mg.kg-1)时，TGF-β1表达不降反而升高。对应用大剂量葛根素的研究发现，小鼠出现了明显的腹泻症状，小鼠死亡率明显升高，CK-MB水平显著增高、心肌病理变化严重，Nrf2、HO-1、Fas、TGF-β1mRNA及蛋白表达水平出现变化；Nrf2与HO-1间、Nrf2与Fas间、Nrf2与TGF-β1无相关性。因此我们得出：Nrf2在VMC中表达增高，参与了VMC的发生、发展过程；Nrf2在VMC中具有抗氧化、抗心肌细胞凋亡、抗心肌纤维化的作用；Pue对VMC的治疗作用可能是通过激活Nrf2起作用，但同时可能存在其他途径发挥抗氧化、抗凋亡、抗纤维化作用；大剂量应用Pue时，治疗作用无相应增加，反而出现腹泻不良反应。