第一章:硬皮病小鼠模型的建立及CTGF在其皮肤组织中的表达目的:建立博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的硬皮病小鼠模型,并检测CTGF mRNA在该模型皮肤组织中的表达,以期进一步探讨BLM诱导硬皮病的机制.方法:1.造模:将24只雌性BALB/c小鼠随机分为模型组和生理盐水对照组,分别背部皮下注射0.1ml BLM(300μg/ml)和等体积生理盐水,每日1次×4周.2.最后一次注射后的24h取注射部位皮肤进行以下检测:石蜡切片行组织病理学检查及真皮厚度测量;比色法测定皮肤羟脯氨酸含量;原位杂交法进行CTGF mRNA表达细胞定位;半定量RT-PCR法测定皮肤pro-COL1A1及CTGF mRNA表达量.同时取肺组织行组织病理学检查.第二章:血竭的抗纤维化作用及其机制的初步研究目的:探讨血竭(dragons blood,DB)在BLM诱导的硬皮病模型小鼠中的抗纤维化作用及其分子机制.方法:1.60只BALB/c小鼠随机分为生理盐水对照组(A)、模型组(B)、青霉胺组(C)、低剂量血竭组(D)、高剂量血竭组(E)5组,每组各12只.B、C、D、E组小鼠背部皮下注射0.1ml BLM(300μg/ml),A组则皮下注射0.1ml生理盐水.同时,C、D、E组分别以125mg/kg青霉胺、1g/kg DB、2g/kg DB灌胃,A、B组以等体积生理盐水灌胃,均为每日1次,连续4周.2.最后一次注射后的24h取注射部位皮肤分别行组织病理学检查及真皮厚度测量,并用比色法测定皮肤羟脯氨酸含量,半定量RT-PCR法检测皮肤pro-COL1A1、TGF-β1及CTGF mRNA表达量.