猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)引起猪圆环病毒病(Porcine circovirus diseases,PCVDs)或猪圆环病毒相关疾病(Porcine circovirus-associated diseases,PCVADs),严重危害全球养猪业。PCV2吸附在细胞表面的糖胺聚糖上,经胞吞入胞,并在胞内蛋白酶作用下将核酸释放进细胞质,之后,核酸在宿主因子的作用下转移至细胞核中进行复制,并依赖宿主元件进行组装,最后利用宿主因子释放出病毒粒子。因此,研究宿主因子在病毒感染过程中的作用有望解析PCV2的致病机制。本研究基于前期PCV2感染PK-15细胞的转录组测序(RNA Sequence,RNA-Seq)结果,通过生物信息学分析筛选PCV2感染相关的宿主因子。结果筛选出18个差异表达基因,包括12个上调基因和6个下调基因。同时,利用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,RT-qPCR)方法对18个差异表达基因进行验证,发现5个下调基因HMGB2、CLDN6、TNFSF4、THBS1、IFNGR1的mRNA表达情况与RNA-Seq结果一致,而BCL2L11基因的mRNA表达情况与RNA-Seq结果相反;12个上调基因中,IL23A、SAA2、CD40、CCL3L1、CCL4、STAT2、OASL、ISG15的mRNA表达情况与RNA-Seq结果相似,而IL6、IRF1、CXCL10、IL28表达量与RNA-Seq结果相反。腺苷5’-单磷酸活化蛋白激酶(Adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)和蛋白磷酸酶2A(Protein phosphatase 2A,PP2A)为3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(3-Hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase,HMGCR)的上游调节因子,分别通过对HMGCR上第872位丝氨酸磷酸化和去磷酸化来调节HMGCR的活性。我们前期研究发现,PCV2感染早期促进HMGCR磷酸化水平,从而促进PCV2增殖,但HMGCR参与PCV2感染调节机制尚不清晰。转录组分析发现,PCV2感染过程中AMPK表达上调,而并未检测出PP2A的差异。因此,推测PCV2感染过程中主要由AMPK调控HMGCR活性。本研究利用蛋白印迹、免疫共沉淀等方法在蛋白水平上验证这一推测,结果表明,PCV2感染促进AMPK、PP2A的活性而抑制HMGCR的活性;PCV2感染早期,AMPK对HMGCR活性起主要调控作用,PP2A对HMGCR活性影响较小;另外,免疫共沉淀实验进一步证实HMGCR与PCV2的Cap和Rep蛋白相互作用。骨髓细胞核分化抗原样蛋白(Myeloid cell nuclear differentiation antigen-like Protein,MNDAL)是干扰素诱导蛋白P200家族的成员之一。P200家族蛋白参与多种病毒感染,但尚未报道MNDAL是否影响PCV2感染。前期转录组分析发现,PCV2促进MNDAL基因表达。因此,选择MNDAL为研究对象,通过构建稳定表达猪源MNDAL的细胞系,研究了MNDAL在PCV2感染过程中的作用。结果表明,MNDAL显著促进PCV2增殖;在PCV2感染过程中,MNDAL也可抑制PK-15细胞的凋亡。综上所述,PCV2感染过程受到多种宿主因子调控。因此,研究宿主因子在PCV2感染过程中的作用有助于理解PCV2的致病机理,也为抗病毒治疗提供新思路。