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目的：探讨乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）与p16基因甲基化的关系，研究脱氢表雄酮（DHEA）对p16基因甲基化以及细胞周期和细胞凋亡的调节作用。
方法：以稳定表达绿色荧光蛋白基因/HBV X基因（GFP/HBV X）融合蛋白的HepG2细胞系作为本课题的实验系统。MTT法检测已稳定表达HBV X蛋白的HepG2/GFP—HBx细胞、HepG2/GFP、HepG2细胞加DHEA后细胞的生长情况，通过流式细胞仪检测细胞周期和凋亡的变化。通过甲基化特异性PCR（MSP）检测胞内p16基因的甲基化状态。采用SPSS11.5统计软件进行方差分析，P<0.05认为差异有统计学意义。
结果：MTT检测表明与HepG2和HepG2/GFP组相比，HepG2/GFP—HBx组细胞的增殖速度提高（P<0.05）。流式细胞术检测示HepG2/GFP—HBx细胞G0/G1期细胞百分比38.65％±1.32％，较HepG2/GFP、HepG2的46.63％±1.37％，47.08％±1.55％显著减少（P<0.05），细胞分裂周期缩短。流式细胞术检测示HepG2/GFP—HBx细胞凋亡率0.3％±0.05％，较HepG2/GFP、HepG2细胞的凋亡率3.6％±0.5％，3.7％±0.6％显著减少（P<0.05）。MSP检测表明，表达GFP/HBx融合蛋白的HepG2/GFP—HBx肝癌细胞出现了p16基因甲基化，不表达HBx的HepG2和HepG2/GFP细胞未见可检测的p16基因甲基化。加100μ mol/1的DHEA后，三种细胞的增殖速度降低（P<0.05），HepG2/GFP—HBx、HepG2/GFP、HepG2细胞G0/G1期细胞百分比分别为57.69％±2.11％、71.78％±2.84％、72.74％±2.75％，较未加药组显著增加（P<0.05），分裂周期延长。HepG2/GFP—HBx、HepG2/GFP、HepG2细胞凋亡率分别为9.3％±0.8％、19.4％±1.2％、19.8％±1.1％，较未加药组显著增加（P<0.05）。DHEA可下调HepG2/GFP—HBx细胞的p16基因启动子甲基化水平，但对HepG2和HepG2/GFP细胞的p16基因启动子甲基化水平不产生影响。
结论：HBx引起肝癌细胞p16基因甲基化，并缩短细胞周期抑制细胞凋亡；DHEA可明显下调HBx引起的p16基因甲基化水平，延长细胞周期促进细胞凋亡，在无HBx基因整合的情况下，DHEA对肝癌细胞生长、细胞周期和凋亡的影响不通过p16基因甲基化的途径实现。