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苯噻菌酯(benzothiostrobin)是由华中师范大学研发的一种新型甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂。苯噻菌酯具有杀菌谱广,杀菌活性高,施用量低,持效期长等优点,具有保护及治疗作用,对作物白粉病、霜霉病均表现出优越的防效,具有良好的市场开发前景。为了进一步研究苯噻菌酯的安全使用、残留控制及最大残留限量(MRL)的确定,本研究建立了能定量检测苯噻菌酯的高效液相色谱分析方法,同时依据苯噻菌酯特异性单克隆抗体,建立了酶联免疫分析和免疫层析分析方法。采用高效液相色谱法,使用C18反相色谱柱,以乙腈-三氟乙酸水溶液(65：35,V/V)为流动相,流速为0.8 mL/min,在UV 230 nm下,对苯噻菌酯进行定量测定。在0.1～10 mg/L范围内,苯噻菌酯浓度与色谱峰面积呈良好的线性关系,相关系数为0.9999,相对标准偏差为0.332%,平均回收率为102.7%。通过对苯噻菌酯进行水解合成了苯噻菌酯半抗原,将苯噻菌酯半抗原与牛血清蛋白(BSA)偶联制备了免疫原,与卵清蛋白(OVA)偶联制备了包被抗原。经紫外光谱分析证明人工抗原偶联成功,免疫原和包被原的结合比分别为17：1和8：1。免疫BALB/c小鼠获得相应的单克隆抗体。当包被抗原的浓度为4 mg/L时,单克隆抗体的效价达到6.3×106。利用制备的特异性单克隆抗体建立了能够用于检测苯噻菌酯残留的酶联免疫分析方法。通过对工作浓度、甲醇含量、离子强度、pH值的优化,确定了抗原抗体的最佳反应条件。在最佳优化条件下(5%甲醇PBS溶液、Na+0.3M、pH6.5),该方法检测苯噻菌酯的抑制中浓度(IC50)和最低检测浓度(IC1o)为7.55和0.428μg/L。建立的ic-ELISA除了对吡唑醚菌酯有交叉反应外(0.34%),与苯噻菌酯结构类似化合物没有明显的交叉反应。稻田水、土壤、番茄、大米和梨中的平均添加回收率为80.43～113.83%,满足苯噻菌酯残留检测要求。真实样品的检测结果表明ELISA与高效液相色谱法具有高度的相关性(y=1.0867x+0.0318,R2=0.9894)。证明建立的ic-ELISA能够高灵敏地检测农产品和环境样品中苯噻菌酯的残留。在金标抗体和最优半抗原的基础上,制备了免疫层析试纸条,并建立了一种可以快速(5分钟)、简便的检测不同样品中苯噻菌酯的免疫层析分析方法(ICA)。在最优条件下,所建立的ICA对苯噻菌酯的100%抑制浓度为0.1 mg/L,最低检测限0.05mg/L。通过对7种甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂交叉反应的研究,建立的ICA对苯噻菌酯具有特异的选择性。对稻田水、稻米、土壤、梨、番茄5种样品进行添加回收试验,并对梨、土的真实样品进行检测,同时将检测结果和HPLC进行比对,试验结果表明,试纸条现象与真实浓度检测结果一致,可用于农产品中苯噻菌酯农药残留的快速检测。本研究所建立的免疫层析分析方法简便、快速、灵敏度高、不需要特殊的仪器和试剂、费用低、对人员素质要求不高,有较好推广应用前景。