棕榈酸通过氧化应激诱导心肌成纤维细胞凋亡研究

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chongai2009
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目的:探讨棕榈酸(palmitic acid,PA)对心肌成纤维细胞(cardiac fibroblast,CFb)的凋亡作用。  方法:1-3天内的SD新生乳鼠心脏,使用浓度为0.1%的胶原蛋白酶消化后,用差速贴壁法单离出CFb,培养3-5代CFb后将其转移至六孔板,0-1600μMPA处理4h后,使用CCK-8检测PA对CFb活力影响;选择200μM处理CFb0h,8h,12h,24h后,Hoechst33342染色观察PA对CFb凋亡的影响;流式细胞术观察PA对CFb中ROS水平的影响;使用比色法测定丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。  结果:1.与0μM的PA处理组相比,25-200μM的PA处理4h组对CFb细胞活力无明显影响(P>0.05);400-1600μM的PA能明显降低CFb细胞活力(P<0.05)。  2.200μM PA处理CFb不同时间后,Hoechst33342染色结果显示,与0h组比较,处理8h,12h和24h后,细胞核变圆,染色质边聚,细胞发生了明显凋亡。  3.200μMPA处理CFb不同时间后,与0h组比较,处理8h,12h和24h后,细胞内ROS水平显著升高(P<0.05)。  4.200μMPA处理CFb不同时间后,与0h组比较,处理8h,12h和24h后,细胞内MDA水平显著升高(P<0.05)。  5.200μMPA处理CFb不同时间后,与0h组比较,处理8h,12h和24h后,细胞内SOD水平显著降低(P<0.05)。  结论:PA可能通过诱导ROS生成,提高氧化应激诱导CFb细胞凋亡。
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