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目的:子宫腺肌病是生育期妇女较常见的妇科病,指子宫内膜腺体和基质存在肌层伴随着周围肌细胞弥漫性增生。子宫腺肌病通常被认为是子宫内膜异位症的一种特殊形式,被称内在性内异症。内异症虽然被称为良性疾病,但是存在新血管形成,增殖增加、凋亡减少,粘附和侵袭能力增加等类似恶性肿瘤的特征。本实验通过检测干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因(gene associated withretinoid-interferon-induced mortality-19,GRIM-19)在正常内膜、子宫腺肌病在位和异位子宫内膜的表达情况,探讨GRIM-19在子宫腺肌症中作用,同时进行体外实验研究GRIM-19表达变化对细胞凋亡和血管生成方面的影响,探讨GRIM-19在子宫腺肌病中可能的机制。 方法: 体内实验:收集正常内膜即对照组(增殖期6例,分泌期4例)、子宫腺肌病在位内膜和异位子宫内膜(增殖期17例,分泌期13例),采用免疫组化法检测GRIM-19、磷酸化信号转导和转录激活因子3(Y705)(phospho-signal transducerand activator of transcription3(Y705),pSTAT3(Y705))、血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)的定位和表达情况;采用CD34免疫染色分析对照组和腺肌病组织中微血管密度(MVD)变化;采用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)分析细胞凋亡情况;Western blotting技术分析对照组与子宫腺肌病在位组织中GRIM-19、p-STAT3(Y705)、信号转导和转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription3,STAT3)和VEGF蛋白表达水平。体外实验:通过pEGFP GRIM-19质粒和GRIM-19-siRNA技术将Ishikawa细胞中GRIM-19高表达和低表达,采用Western blotting技术检测p-STAT3(Y705)、STAT3和VEGF蛋白变化水平。 结果: 1、对照组、子宫腺肌病在位和异位子宫内膜中,GRIM-19的阳性反应主要在腺体胞质中;GRIM-19蛋白水平在对照组和子宫腺肌病在位组织中并没有随月经周期而发生显著性改变(P>0.05);子宫腺肌病在位组织中GRIM-19蛋白水平较对照组显著下降(P<0.01)。 2、子宫腺肌病在位和异位子宫内膜中TUNEL阳性细胞数量显著低于对照组,(P<0.01);子宫腺肌病异位子宫内膜中细胞凋亡数量低于腺肌病在位组织(P<0.05);上述两者差异均有统计学意义。在3组中,细胞凋亡数量并没有随月经周期而发生显著性改变(P>0.05)。 3、p-STAT3(Y705)主要表达在对照组、子宫腺肌病在位和异位子宫内膜腺体细胞核中;p-STAT3(Y705)的蛋白水平在对照组和子宫腺肌病在位内膜中并没有随月经周期而发生显著性改变(P>0.05); p-STAT3(Y705)蛋白在子宫腺肌病在位组织中表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),同时STAT3的蛋白水平在上述2组中无明显差异(P>0.05)。 4、VEGF主要分布于内膜组织中的腺体胞质中;VEGF的蛋白水平在子宫腺肌病在位组织中明显比对照组增加,有统计学意义(P<0.01);2组中VEGF的蛋白水平并没有随月经周期而发生显著性改变(P>0.05)。 5、子宫腺肌病内膜中MVD明显比对照组增加,有统计学意义(P<0.05);异位子宫内膜中MVD显著高于子宫腺肌病在位组织,有统计学意义(P<0.05)。 6、过表达GRIM-19后,p-STAT3(Y705)和VEGF蛋白水平明显下降(P<0.05);下调GRIM-19导致p-STAT3(Y705)和VEGF蛋白水平明显增高(P<0.05);过表达和下调组中,STAT3蛋白水平均无明显变化(P>0.05)。 结论: GRIM-19表达异常可能通过GRIM-19-STAT3-VEGF轴调节血管生成和细胞凋亡促进了子宫腺肌病的发生。