【摘 要】
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目的:比较了自然孵化法、去透明带法、免疫外科法去滋养层三种方法对胚胎贴壁率、平均贴壁时间及ICM克隆形成率的影响.观察了鼠囊胚在小鼠原代胎儿成纤维细胞饲养层上的生长
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目的:比较了自然孵化法、去透明带法、免疫外科法去滋养层三种方法对胚胎贴壁率、平均贴壁时间及ICM克隆形成率的影响.观察了鼠囊胚在小鼠原代胎儿成纤维细胞饲养层上的生长行为.方法:超排卵获得囊胚共93枚,随机分成A、B、C三组.分别采用A组:自然孵化法;B组:去透明带法;C组:免疫外科法去滋养层,分离获得ICM.观察鼠囊胚及ICM在饲养层上的生长行为.结果:三组胚胎贴壁率、ICM克隆形成率、平均贴壁时间分别为A组:83﹪、83﹪、36~48h;B组:82﹪、82﹪、24~36h;C组:71﹪、71﹪、24~36h.滋养层细胞与ICM同时增殖,但滋养层细胞扩展范围小,不形成一层半透明膜状结构.ICM在接种后第4~5d时能够充分增殖且未分化,垂直隆起生长,呈典型的卵圆柱状结构.结论:三种方法对胚胎贴壁率、ICM克隆形成率无显著差异,去透明带法、免疫外科法使胚胎平均贴壁时间短于自然孵化法.滋养层细胞与ICM同时增殖,但滋养层细胞扩展范围小,仅限于ICM的周围.ICM在接种后第6天时,典型的卵圆柱状结构则衍变成多层柱状结构,表面覆盖有大量内胚层样细胞,AKP染色呈弱阳性,此时,分离ES细胞的成功率较低.
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