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随着对肿瘤分子本质认识的深入和分子生物学技术的迅速发展,肿瘤基因治疗已成为当前生物医学领域的研究热点之一。胃癌是我国最常见的恶性肿瘤之一,也是消化系肿瘤研究的重点内容。同其它肿瘤一样,胃癌的发生发展与P53肿瘤抑制基因的突变及P53蛋白的失活密切相关,将外源性野生型P53基因(wtTP53)转移到恶性肿瘤细胞内以抑制肿瘤发生、阻止肿瘤生长,可能是肿瘤基因治疗的有效方法之一。此外,单纯疱疹病毒的脱氧胸腺嘧啶核苷激酶(HSV-TK),可催化对真核细胞无毒或无活性的核苷类似物丙氧鸟苷(GCV)磷酸化,成为具有抑制核酸合成的抗代谢药物,可选择性地杀伤快速增殖的肿瘤细胞。因此,HSV-TK基因是目前常用于肿瘤基因治疗的药物敏感基因之一。 本研究工作旨在构建wtTP53和HSV-TK基因的重组逆转录病毒真核细胞表达载体,并将其转染胃癌细胞,观察外源性wtTP53基因对胃癌细胞生物学特性的影响及HSV-TK/GCV系统对胃癌细胞的杀伤作用。其内容包括: 1、用限制性内切酶分别将人wtTP53 cDNA和HSV-TK cDNA从其克