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间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSC)是干细胞的一种,因能分化为间质组织而得名,具有亚全能分化潜能,在特定的体内外环境下,能够诱导分化成为多种组织细胞。间充质干细胞具有干细胞的共性,即自我更新、多向分化和归巢的能力。脐带血中间充质干细胞含量丰富、增殖潜能高、免疫原性低、支持造血功能强,并且取材方便,其采集对母亲和胎儿没有任何不良影响。自身使用没有组织配型的问题,供他人使用时产生严重免疫排斥反应的可能性较低,适用人群广泛。
目前,脐带间充质干细胞的保存方法主要是添加保护剂后程控降温,液氮保存,但是这种方法比较繁琐,且费用较高,该方法还有很多需要提高完善的地方。
玻璃化方法作为一种新型的,简便的保存方法,有效地克服了慢速冻存的缺点,但是玻璃化方法需要高浓度的保护剂才能实现,这会给细胞带来很大的渗透损伤和毒性损伤。本文首先在国内提出了玻璃化保存脐带间充质干细胞思想,对联合玻璃化保护剂的特性,联合玻璃化保护剂的渗透毒性,降温速度等问题进行了系统的实验研究。
本实验室同深圳北科生物科技公司联合研发了一种对人体低毒的细胞冻存液,传统的冻存液对细胞及对人体都有比较大的毒性,本文首先查阅了大量的文献,综合考虑了各种冻存液对人体以及对细胞的毒性,选出两种对细胞及人体毒性最小的渗透性玻璃化冻存液,加上蔗糖,聚乙烯醇(PVA)等大分子,冻存后细胞的存活率达到95%以上。聚乙烯醇经过我们实验室详细论证,可以有效的减少降温及复温过程中冰晶的生成。