柏树火焰层孔菌液体发酵培养及其多糖的初步研究

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柏树火焰层孔菌是中国以及亚洲菌物的新记录属中的新记录种,是一种稀有的药用菌。   采用单因素试验设计考察液体发酵培养的转速、温度、pH、装瓶体积、接种量、碳源、氮源、C/N等对菌丝体产量的影响,以寻求高产的生长条件和经济的培养基。结果表明,菌丝生长最适碳源为葡萄糖,最适氮源为麸皮,P、K、Mg对菌丝的生长具有促进作用,最适C/N为20:1-25:1;菌丝生长的最适转速条件为150r.min-1,温度25-30℃,最佳pH为5-7,最适装瓶体积为100mL,最适接种量为8mL·100mL-。均匀试验筛选出液体发酵培养的最佳营养条件为:葡萄糖25g·L-1,麸皮175g·L-1,KH2PO40.35g·L-1,pH5.5。通过生长曲线试验得到Logsitic方程:y=0.22/(1+1.019e-0.013x),发酵终点11-14d。   采用蒽酮-硫酸法测定多糖含量。通过单因素试验法,对柏树火焰层孔菌子实体、菌丝体以及发酵液中多糖的热水浸提工艺进行了优化。三者的较优工艺分别是:提取温度90℃、时间3h、水料比40:1、提取次数2次,子实体多糖得率可达1.20%;提取温度90℃、时间3h、水料比50:1、提取次数2次,菌丝多糖得率可达4.35%;浓缩倍数1:5、温度80℃、醇沉浓度80%和pH6,胞外多糖得率可达20.24mg·L-1。菌丝体多糖得率是子实体多糖得率的3倍多。   采用MTT法测定子实体多糖、菌丝体多糖和胞外多糖对S180瘤株的体外抑制作用。结果表明:子实体多糖和菌丝体多糖对S180均有一定的抑制作用,IC50分别为163.53、846.40μg·mL-1。胞外多糖抑制作用不明显。
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